تعيين انتشار جغرافيايي تيلريا اويس در بزان استان تهران به روش مولكولي

تيلريا اويس يكيا ز عوامل تك ياخته اي خوني خوش خيم در گوسفند و بز در بسياري از مناطق گرمسيري و نيمه گرمسيري بوده كه توسط كنه هاي خانواده ايكسوديده انتقال مي يابد. اين مطالعه براي تعيين پراكنش تيلريا اويس بر روي جمعيت 044 راس بز به ظاهر سالم در استان تهران انجام گرديد. گسترش هاي خوني تهيه شده پس از رنگ آميزي با روش گيمسا، تحت آزمايشات ميكروسكوپي قرار گرفتند. به منظور تشخيص مولكولي، استخراج DNA از خون صورت گرفت و متعاقب آن به منظور تفريق گونه هاي تيلريا و بابزيا از يكديگر با آغازگرهاي اختصاصي منشعب از ژن كد كننده 18SrRNA ) )آغازگر 1، آغازگر 2 تكثير پيدا كرد. به منظور تفريق گونه هاي تيلريا از يكديگر آزمايش Semi-nested PCR با آغازگرهاي اختصاصي منشعب از ژن ms 1-2 براي تيلريا لستوكاردي )آغازگر 0، آغازگر 6(، تيلريا آنولاتا )آغازگر 5، آغازگر 6( و براي تيلريا اويس با آغازگر اختصاصي منشعب از ژن 18SrRNA ( آغازگر 2، آغازگر 3( انجام شد. 7 مورد از 044 نمونه( به تيلريا اويس ( %1/ نتايج ميكروسكوپي نشان داد كه 7 آلوده بوده در حالي كه در بررسي Semi-nested PCR 20 مورد از 044 ( %6 نمونه( براي تيلريا اويس مثبت بودند. نتايج اين بررسي نشان داد كه تيلريا اويس در بزان بدون علايم باليني قابل شناسايي است. بنابراين آنها مي توانند به عنوان مخازن عفونت براي كنه ها و عامل انتقال انگل به گوسفند در نظر گرفته شوند.

Theileria ovis is one of the benign hemoprotozoal agents in sheep and goat in tropical and subtropical regions which is transmitted by ixodid ticks. This study was carried out on 400 randomly selected healthy goats for determining the distribution of T. ovis. After preparing the blood smears, they were examined staining by Giemsa method for microscopic studies. In order to molecular diagnosis, DNA was extracted from blood samples. Subsequently, the genomic DNA from piroplasms was first extracted and then amplified with the primer pair using hyper variable region V4 of 18S rRNA for simultaneous differentiation of Theileria and Babesia. Differential diagnosis of Theileria ovis from T. annulata and T. lestoquardi was performed using Semi-nested PCR technique on the PCR products with primers specific derived from hyper variable region V4 of 18S rRNA, P2, P3 for T. ovis and with primers specific derived from ms1-2 gene for T. lestoquardi (P4, P6) and T. annulata (P5, P6). The results of microscopic examinations showed that 1.7 % (7/400) were positive for the presence of T. ovis in comparison to T. ovis which were 6% (24/400) in Semi-nested PCR. The results of present study revealed that T. ovis is detectable in goats without any clinical manifestation. Therefore, the goats can be served as reservoirs of the infection for ticks and transmission agents of this parasite to the sheep.