اثر ضد ميكروبي عصاره هيدروالكلي مرزه سفيد و نانوذره اكسيد روي بر بيان ژن كواگولاز در نمونه هاي باليني و استاندارد استافيلوكوكوس ارئوس مقاوم به متي سيلين

Antimicrobial effect of hydroalcoholic extract of saturega multica and zinc oxide namoparticle on coagulase gene expression on clinical and standard samples of MRSA (Methicilin resistant staph aureus)

زمینه و هدف: استافیلوكوكوس اورئوس مقاوم به متی سیلین(MRSA)، از پاتوژن‌های مهم بیمارستانی است و باعث بیماری‌های شدید و كشنده در سراسر جهان می‌شود. كواگولاز یك فاكتور بیماری‌زایی مهم برای این باكتری محسوب می‌شود و در تمام ایزوله‌های استافیلوكوكوس ارئوس وجود دارد. در سال‌های اخیر مطالعه‌های در رابطه با اثرات گیاهان دارویی، نانوذرات بر علیه باكتری‌ها و هم‌چنین بیان ژن‌های بیماریزای باكتری‌ها انجام شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر ضد باكتریایی عصاره مرزه سفید و نانوذره اكسید روی بر بیان ژن كواگولاز در باكتری استافیلوكوكوس ارئوس مقاوم به متی‌سیلین بود. روش‌بررسی: در این مطالعه نیمه تجربی با استفاده از روش میكروبراث دایلوشن و روش MTT، میزان حداقل غلظت مهاركنندگی (MIC) عصاره هیدروالكلی مرزه سفید و نانوذره اكسید روی برعلیه سویه‌های MRSA بررسی و تعیین شد. در مرحله بعد با استفاده از روش رونوشت برداری و واكنش زنجیره‌ای پلی‌مراز((RT- PCR بیان ژن coa در تیمارهایی كه تحت تأثیر عصاره مرزه سفید و نانوذره اكسید روی قرار گرفتند، به صورت كیفی مورد بررسی قرار گرفت. داده‌ها با استفاده از آزمون‌های آماری كروسكال والیس و تست تعقیبی شفه، فیشر، آنالیز واریانس  و كولموگروف اسمیرنف تجزیه و تحلیل شدند. یافته ها: میزان MIC عصاره هیدروالكلی گیاه مرزه سفید برای سویه استاندارد و بالینی استافیلوكوكوس ارئوس به ترتیب 3000 و 1500میكروگرم در میلی‌لیتر بود هم‌چنین MIC نانوذره اكسید روی بر ایزوله‌های استانداد و بالینی به 40 و 20  میكروگرم بر میلی‌لیتر بود. عصاره مرزه سفید در علظت‌های MIC دارای اثر مهاری بر بیان ژن coa بود در حالی كه نانوذره اكسید روی تأثیری بر بیان ژن مورد نظر نداشت. نتیجه‌گیری: نتایج نشان دهنده كاهش بیان ژن coa در شرایط آزمایشگاهی  به روش RT- PCRبه وسیله مرزه سفید می‌باشد، ولی تأثیری بر بیان ژن Housekeeping arcC  ندارد. هم‌چنین نانوذرات اكسید روی دارای اثر مهاری بر رشد باكتری بوده، ولی اثر مهاری بر بیان ژن coa نداشت.  استافیلوكوكوس ارئوس مقاوم به متی سیلین ، coa ، RT- PCR

Background & aim: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) as nosocomial pathogens have been causing severe and deadly diseases around the world.  Coagulase is an important virulence factor for this bacterium and exisist in all staphylococcus aureus isolates. In recent years, studies carried out into the effects of medicinal plants, nanoparticles against bacteria and pathogenic bacteria’s expression genes. The aim of this study was to investigate the antimicrobial effect of satureja mutica hydroalcoholic extract, zinc oxide nanoparticle, and zinc complex on the coagulase gene expression in clinical and standard isolates of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) Methods: In the present quasi-experimental study, using micro dilution and MTT, the minimum inhibitory concentration (MIC) of hydro-alcoholic extracts of satureja mutica and zinc oxide nanoparticles were tested against MRSA strains. By polymerase chain reaction ((RT- PCR) coa gene expression in satureja mutica extract and zinc oxide nanoparticles treated were qualitatively evaluated. Data were analyzed using statistical tests Results: The MIC of hydro alcoholic extract of Satureja mutica  for standard strains and clinical S. aureus  were 3000 and 1500 µg/ml respectively, whereas, the MIC  of nanoparticle zinc oxide on Standards and clinical isolates  were 40 and 20 µg/ml.The hydro alcoholic extract of Satureja mutica on MIC concentration has significant inhibitory effect on coagulase gene expression but no effect was seen for clinical and standard MRSA. Conclusion: The results show a decline in the coa gene expression in vitro by RT- PCR method using satureja mutica  , but no effect on gene expression Housekeeping arc C. An inhibitory effect was observed on bacterial growth by zinc oxide nanoparticles, but no inhibitory effect on gene expression was seen.