اثر برون تني عصاره هيدروالكلي پوست درخت گردو بر برخي پاتوژن هاي باكتريايي ماهي

Invitro effect of juglans regia li. stem bark hydroalcoholic extract on some bacterial pathogens of fish

پرورش دهندگان ماهي، ساليانه به دليل تلفات ناشي از عفونت هاي ايجادي توسط باكتري هاي مقاوم به آنتي بيوتيك متحمل ميليونها دلار خسارت ميشوند. فعاليت متابوليت هاي ثانويه گياهان بر گونه هاي مختلفي از باكتري هاي گرم مثبت در مقياس ميكرومولار و كمتر از آن گزارش شده است و عصاره گياهان به عنوان عوامل مهمي در جلوگيري از توسعه مقاومت آنتي بيوتيكي ميباشند. از اين جهت در مطالعه حاضر، اثر ضد باكتريايي عصاره پوست درخت گردو بر برخي باكتريهاي بيماري زاي مهم جداسازي شده از ماهي مانند: آيروموناس هيدروفيلا، يرسينيا راكري، استرپتوكوكوس اينيايي، استافيلوكوكوس آريوس و سالمونلاتايفي موريوم مورد بررسي قرار گرفته است. جهت انجام اين تحقيق در ابتدا عصاره هيدروالكلي پوست درخت گردو در آزمايشگاه فارماكولوژي دانشكده دامپزشكي دانشگاه شهيد چمران بر اساس دستورالعمل استاندارد، تهيه گرديد. سپس جهت تعيين كنترل مثبت براي هر باكتري از روش كربي- باور با ديسك هاي آنتي بيوتيكي استاندارد استفاده گرديد. ارزيابي برون تني اثر عصاره هيدروالكلي پوست درخت گردو نيز با روش كربي-باور انجام و حداقل غلظت مهاري عصاره با روش انتشار ديسك (E-test) و ماكرودايلوشن (رقت سازي در لوله) تعيين گرديد. بر اساس نتايج حاصل از اين تحقيق، منطقه عدم رشد واضح در مقايسه با كنترل مثبت، تنها در مورد آيروموناس هيدروفيلا و يرسينيا راكري مشاهده گرديد. اما واكنش واضحي در خصوص باكتري هاي ديگر مشاهده نگرديد. حداقل غلظت مهاري با روش انتشار ديسك در خصوص يرسينيا راكري و آيروموناس هيدروفيلا به ترتيب 9/3 و 5/62 ميلي گرم بر ميلي ليتر و با روش ماكرودايلوشن به ترتيب 9/3 و 5/62 ميلي گرم بر ميلي ليتر و حداقل غلظت باكتري كشي آن به ترتيب 81/7 و 125 ميلي گرم بر ميلي ليتر ارزيابي گرديد. يرسينيا راكري و آيروموناس هيدروفيلا از باكتري هاي مهم در صنعت پرورش آبزيان ميباشند و تاثير عصاره پوست درخت گردو بر آنها مثبت ارزيابي گرديد اما قطعاً كارهاي بيشتري در خصوص بررسي ايمني و سميت آن مورد نياز ميباشد. در خصوص باكتريهاي ديگري كه تاثير مناسبي از اين عصاره بر آنها مشاهده نگرديد، پيشنهاد ميگردد كه از عصاره پوست درخت گردو كه با روشهاي ديگر تهيه شده اند، استفاده شود زيرا نوع حلال و روش تهيه عصاره ميتواند اثر ضد باكتريايي آن را تحت تاثير قرار دهد.

Fish farmers are losing millions of dollars annually due to the large scale mortality of fish due to diseases caused by antibiotic resistance pathogens. Plant secondary metabolites show activity in the micro to submicromolar range to Gram-positive species. Plant extracts decrease the selective pressure for developing antibiotic resistance. Hence, in the present study antibacterial effect of hydroalcoholic extract of Juglans regia Li. compound against Aeromonas hydrophila, Yersinia ruckeri, Streptococcus iniae, Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium were screened. By standard protocol, hydroalcoholic extract of Juglanse regia Li. stem bark in pharmacology department of Shahid Chamran Veterinary School was prepared. To determine the positive control for each bacterial, antibiogram was done. In vitro evaluation of antibacterial effect of extract was done by disc diffusion method (Kirby bauer) and minimum inhibitory concentration was determind by E-test and macrodilution method. According to result in this study, clear inhibition zone compared with the positive control was seen about A.hydrophila and Y.ruckerii. But no strong effect on other studied bacteria was observed. By E-test, minimum inhibitory concentration of extract in Y.ruckerii and A.hydrophila was evaluated, 3.9 and 12 mg/ml, respectively. Minimum inhibitory concentration of extract in Y.ruckerii and A.hydrophila by macrodilution was 3.9 and 62.5 mg/ml and minimum bactericidal concentration was 7.81 and 125 mg/ml, respectively. Y.ruckerii and A.hydrophila are important bacteria in the aquaculture industry and hydroalcoholic extract of this plant was effective on them but more work should be done on its safety and toxicity. Other studied bacteria which extract had any effect on them, should be examined with other form (alcoholic or aqueous) of stem bark Juglans regia Li. extract because type of solvent or the method of preparation can affect antibacterial activity of extract.