بررسي ساركوسيستيس در شتر و بز با ميكروسكوپ الكتروني و PCR - RLFP

Study of camel and goat Sarcocystis by electron microscopic and PCR- RFLP

ساركوسيستيس يكي از بزرگ‌ترين گونه‌هاي تك‌ياخته در شاخه اپي كمپلكسا و رده اسپوروزوآ مي‌باشد. ساركوسيستيس يكي از شايع‌ترين انگل‌هاي تك ياخته‌اي در حيوانات اهلي و وحشي است كه گسترش جهاني دارد. بعضي از گونه‌هاي آن باعث آلودگي انسان مي‌شود. در نتيجه اين انگل از نظر دام‌پزشكي و پزشكي( زئونوز) داراي اهميت مي‌باشد. اين مطالعه با هدف شناسائي ميكروكيست و ماكروكيست گونه‌هاي ساركوسيستيس در اندام‌هاي مورد نظر شتر و بزهاي ذبح شده در كشتارگاه با استفاده از روش‌هاي ميكروسكوپ الكتروني و RFLP- PCR انجام گرفت. 166 نمونه بافتي تازه از شتر و بز كشتار شده جمع‌آوري و به كمك روش‌هاي مهري و هضمي، آلوده و غيرآلوده بودن آن‌ها تائيد شد. نمونه‌هاي مثبت در ظرف حاوي سرم فيزيولوژي شسته و براي بررسي ساختار فراريزبيني ديواره كيست‌ها؛ آن‌ها را در گلوتارآلدئيد 4% و جهت بررسي مولكولي تا زمان استفاده در دماي 20- قرار داده شدند. در اين مطالعه نشان داده شده كه شتر فقط به ميكروكيست آلوده مي‌شود و همگي يك گونه(ساركوسيستيس كملي) مي‌باشند. در بز با توجه به توالي‌هاي به دست آمده در كيست‌هاي كوچك و بزرگ مشخص گرديد كه تشابه آن با ساركوسيستيس مولي نزديك‌تر است. تجزيه و تحليل توالي‌هاي بدست آمده نشان مي‌دهد PCR-RFLP روشي مناسب براي تفكيك گونه‌هاي ساركوسيستيس در ميزبان‌هاي متفاوت مي‌باشد. بر اساس ساختار فراريزبيني ديواره كيست و اطلاعات مولكولي توالي DNA، ماكروكيست‌هاي ضخيم و نازك در بز مي‌تواند يك گونه باشد.

Sarcocystis is one of the largest genera of the protozoan phylum apicomplexa, order sporozoa. It is one of the most prevalent parasites in domestic and wild animals, and is a worldwide distributed parasite. Certain species also infect humans, therefore it has economic and public health importance as a zoonosis. Diagnosis of Sarcocystis in camels and goats with Electron microscopy and PCR- RFLP methods and discriminating of different species of Sarcocystis in different hosts was carried out. 166 small pieces of tissues were collected from freshly slaughtered camels and goats by squash and trypsin digestion techniques were applied for the detection of the cysts. The infected organs fixed in glutaraldehyd and frozen at -20 until use for ultrastracturtural and molecular study, respectively. In this study no macrocyst were found in the samples of camels. In camels only microcysts were observed. The cysts in the goats may be probably S.moulei species. But to verify this statement needs more investigation. The results of this study will be helpful in discriminating of different species of Sarcocystis in different hosts. Based on ultrastructural cyst wall and molecular information of DNA sequences in goat, fat and thin macrocysts represent one species.