بررسي بيان mRNA ژن‌هاي IL-2 و IL-12 در خوكچه‏هاي هندي واكسينه شده با واكسن غير فعال شده تب برفكي تيپ O

Evaluation of IL-2 and IL-12 mRNA expression in vaccinated guinea pigs with inactivated type O foot-and-mouth disease vaccine

تب برفكي يك بيماري ويروسي بشدت واگيردار است كه عمدتاً دام‏هاي سم‏شكافته و حيوانات وحشي را متاثر مي‏سازد. تب برفكي در ايران يك بيماري بومي محسوب شده كه گاهي همه‏گيري‏هاي آن موجب خسارت‏ها و تلفات سنگين به خصوص در دام‏هاي جوان مي‏شود. در اين مطالعه، بيان mRNA ژن‏هاي سايتوكايني IL-2 و IL-12 در خوكچه‏هاي هندي واكسينه شده با واكسن غير فعال شده تب برفكي تيپ O (بدون استفاده از ياور) مورد بررسي قرار گرفت. نمونه‏هاي خون از سياهرگ سافن 8 سر خوكچه هندي نر (در دو گروه شاهد و واكسينه) در روز‏هاي 7 و 28 پس از اولين واكسيناسيون گرفته شد. استخراج RNA كل از نمونه‏هاي خون با استفاده از كيت استخراج ستوني صورت گرفت و پس از آن طي واكنش نسخه‏برداري معكوس به cDNA تبديل شد. سپس به منظور بررسي بيان ژن‌هاي IL-2 و IL-12از روش Real-time PCR نسبي استفاده شد. نتايج نشان داد بيان ژن IL-2 در حيوانات واكسينه شده نسبت به گروه شاهد در خونگيري‏هاي اول و دوم تفاوت معني‏داري نداشت، ولي افزايش معني‏داري در بيان ژن IL-12 مشاهده شد (P < 0.05). از تغيير سطوح بيان ژن‏هاي سايتوكايني مي‏توان به عنوان شاخص‏هايي جهت ارزيابي اثرات واكسن‏هاي جديد بر سيستم ايمني در مطالعات آينده استفاده نمود.

Foot-and-mouth disease (FMD) is a severely contagious viral disease that mainly affects cloven-hoofed livestock and wildlife. Foot-and-mouth disease is an endemic disease in Iran that sometimes caused considerable losses of livestock, especially in young animals. In this study mRNA expression of interleukin-2 (IL-2) and interleukin-12 (IL-12) cytokines was evaluated in vaccinated guinea pigs with inactivated type O FMD vaccine (without adjuvant). Blood samples were collected from saphenous vein of eight male guinea pigs (at control and vaccinated groups) at 7 and 28 days after the first vaccination. Total mRNAs were extracted using the column RNA isolation kit and subsequently reverse-transcribed into cDNA. Then relative real-time PCR assay was used to analyze of quanti?cation of IL-2 and IL-12 expression. The expression of IL-2 gene had not significant difference in vaccinated animals compared to the control group in the first and second blood samples but IL-12 gene expression significantly increased (P < 0.05). Evaluation of cytokines genes expression can be as a valuable adjunct for assessment of effects of new vaccines on immune system in future studies.