جداسازي باكتري‌هاي تجزيه‌كننده نشاسته موجود در سيال حفاري چاه 32 فتح واقع در منطقه نفتي آزادگان جنوبي

Isolation of Starch Degrading Bacteria present in Fath Well Drilling Fluid No. 32 Located in the South Azadegan Oil Field

تجزیه زیستی نشاسته مورد استفاده در سیال حفاری توسط میكرو ارگانیسم‌ها، باعث كاهش غلظت این ماده در تركیب و در نتیجه كاهش كارایی سیال می‌شود. پژوهش حاضر با هدف شناسایی باكتری‌های عمده تجزیه كننده نشاسته در سیال حفاری، جهت تعیین رشد و فعالیت این ارگانیسم‌ها انجام شده است. برای این منظور باكتری‌های موجود در سیال برگشتی از چاه جداسازی و فعالیت آمیلازی آنها با استفاده از تست هیدرولیز نشاسته بررسی گردید. جدایه با بیشترین توانایی تجزیه نشاسته در 3 دمای C° 37، C° 45 و C° 55 به‌عنوان سویه منتخب با روش SrRNAا16 مورد شناسایی قرار گرفت و منحنی رشد سویه منتخب رسم گردید. 54 سویه باكتری شامل 26 باسیل گرم مثبت، 22 باسیل گرم منفی و 6 كوكوسی گرم مثبت جداسازی شدند. 18 جدایه از 26 باسیل گرم مثبت اسپوردار بودند. 3 جدایه در هر 3 دمای C˚37، C˚45 و C˚55 رشد و فعالیت آمیلازی قابل توجهی داشت. باكتری با توانایی ایجاد بیشترین هاله آمیلازی به‌عنوان جدایه منتخب برگزیده شد. نتایج حاصل از آنالیز SrRNAا16، شباهت 8/99% جدایه منتخب به باسیلوس لیكنی فرمیس را نشان داد. فعال‌ترین تجزیه كنندگان نشاسته در شرایط ویژه چاه، باسیل‌های گرم مثبت اسپوردار متعلق به جنس باسیلوس نظیر باسیلوس لیكنی فرمیس جدا شده در این تحقیق می‌باشد. شناسایی عوامل تجزیه به منظور انتخاب بیوساید مناسب در جهت ممانعت از تجزیه زیستی حائز اهمیت است.  

Biodegradation of starch used in drilling fluid by many microorganisms, result in reduction of starch concentration in the fluid which leads to fluid efficiency downfall. Present study has been done with the aim of identification of major starch degrading bacteria in the drilling fluid and manner of controling the growth and activity of these organisms. Bacteria peresent in back up drilling fluid,were  isolated and amylase  activity was studied by starch hydrolysis test. Strain with most starch hydrolysis ability in all three temperatures (37, 45 and 55°C) were selected as superior strain and was identified by 16S rRNA. Also growth curve of superior strain was plotted. 54 bacterial strains include  26 Gram-positive bacillus, 22 Gram-negative bacillus and 6 Gram-positive cocci was isolated. 18 strains from 26 Gram-positive bacillus was sporated. Three strains in all three temperatures(37, 45 and 55°C) had growth and significant amylase activity. Bacteria with the ability to create maximum clear halo zone of amylase were selected as superior strain. The results of 16S rRNA analysis showed 99.8% similarity of superior strain to Bacillus licheniformis. Sporated Gram-positive bacillus belongs to Bacillus jenus like Bacillus licheniformis isolataed in this study was the most active degrading bacteria in well special conditions. Identification of degradation factors with the aim of selection of a suitable biocide in order to prevent biodegredeation is recommended.