پراكنش، شناسايي اختصاصي و تنوع بيماري زايي جدايه‌هاي Calonectria pseudonaviculata عامل بيماري بلايت شمشاد در جنگل‌هاي هيركاني

Distribution, specific detection and the pathogenesis variation of Calonectria pseudonaviculata isolates, causal agent of boxwood blight disease, in Hyrcanian forest of Iran

در سال‌هاي اخير شيوع وسيع بيماري سوختگي و ريزش ناگهاني برگ‌هاي درختان شمشاد و متعاقب آن خشكيدگي كامل آنها، با عامل Calonectria pseudonaviculata، سطحي معادل 40000 هكتار از جنگل‌هاي شمال كشور را در معرض نابودي قرار داده است. به منظور بررسي پراكنش اين بيماري طي سال 1393، از گياهان داراي علايم بيماري از مناطق مختلف استان‌هاي گيلان، مازندران و گلستان نمونه برداري شد. ابتدا شناسايي جدايه‌هاي قارچي بر اساس ويژگي‌هاي ريخت‌شناسي و پس از آن با استفاده از آغازگر اختصاصي ITS4و ITS311F انجام شد. تنوع بيماريزايي در جمعيت جدايه‌هاي اين قارچ در گلخانه با تعداد 35 جدايه منتخب همراه شاهد روي نهال شمشاد جنگلي بررسي شد. ويژگي‌هاي ريخت‌شناسي تفكيك كننده اين گونه بر اساس شكل، اندازه و تعداد جداره كنيديوم‌ها، طول استيپ، شكل و اندازه وزيكول انتهاي استيپ، تطبيق ريخت‌شناسي آن را با گونه Cylindocladium pseudonoviculatum به اثبات رسانيد. تمامي جدايه‌ها با استفاده از جفت آغازگر اختصاصي و انجام واكنش زنجيره‌اي پي‌سي‌آر باند 250 جفت بازي توليد نمودند. مقايسه ميزان شدت بيماري‌زايي 35 جدايه اين قارچ، آنها را در گروه‌هاي بيماري‌زايي متفاوت قرار داد. جدايه‌هاي گروه‌هاي مختلف بيماريزايي در هر سه استان وجود داشتند.

During recent years outbreak of box blight trees causing sudden leaf abscission have declined about 40000 hectares boxwood trees in Northern forests of Iran. Calonectria pseudonaviculata is the causal agent of the disease. Distribution of boxwood blight disease was monitored in the northern forests from June to September of 2014. Sampling locations was included: Mazandaran, Gilan and Golestan provinces. The isolates were identified based on morphological characteristics at first, then molecular identification confirmed morphological identification using previously designed species-specific primer ITS113F and ITS4. The pathogenesis variation of Hyracanian isolates was tested in green houses using representative 35 isolates. Boxwood blight fungal agent was isolated from all surveyed areas. Based on morphological criteria including length shape and the number of septates of conidia, also length and vesicle characterization of stips, in addition to the mycellial growth cardinal temperatures, all Iranian isolates identified as Calonectria pseudonaviculta. ITS113F and ITS4 primers amplified the expected 250 bp region in all Calonectria pseudonaviculata isolates specifically. Comparing the pathogenicity of 35 isolates on Buxus sempervirens subsp. Hyrcana saplings revealed pathogenicity degree variation among Hyricanian Cylindocladium pseudonoviculatum divided in groups were scattered in three provinces.