بررسي ميزان آلودگي منابع آب محيطي و بيمارستان هاي شهر ا هواز به باكتري لژيونلا، با استفاده از كشت و تكثيرژن 16S rRNA

Evaluation of Legionella water contamination and environmental pollution in Ahvaz Teaching hospitals using culture and multiplication of 16S rRNA gene.

سابقه وهدف: بيماري لژيونر در نتيجه ي استنشاق آيروسل هاي آلوده ،از منابع آبي مختلف ايجاد مي شود. هدف از اين مطالعه ، بررسي ميزان آلودگي منابع آب محيطي و بيمارستان هاي شهر اهواز به باكتري لژيونلا ، با استفاده از روش استاندارد كشت و روش مولكولي مبتني بر PCR مي باشد. مواد و روش ها: تعداد 100 نمونه آب از منابع مختلف محيطي و بيمارستاني سطح شهر اهواز برداشت و به آزمايشگاه منتقل شد. نمونه ها بعد از تريتمنت اسيدي جهت حذف باكتري هاي مزاحم به محيط هاي كشت BCYE وMWY تلقيح گرديدند. هم چنين از متد PCR ، جهت تكثير ژن 16S rRNA و تاييد ايزوله هاي جدا شده بر روي محيط كشت استفاده شد. يافته ها : نتايج اين مطالعه از طريق كشت نشان داد كه 15 % از مجموع 100 نمونه آب مورد بررسي از نظر حضور لژيونلا ها مثبت بودند كه فراواني نسبي آنها در نمونه هاي بيمارستاني8% و در نمونه هاي محيطي 7% بوده است. تمام نمونه هاي مثبت از طريق كشت ، با انجامPCR ژن16S rRNA مورد تاييد قرار گرفتند. نتيجه گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان مي دهد كه علي رغم استفاده از آب تصفيه شهري 15% نمونه ها به باكتري لژيونلا آلوده بودند. بنابراين جلوگيري از انتشار باكتري با استفاده مداوم از ضد عفوني كنندها، امري ضروري مي باشد.

Aim and Background: Legionnaires’ disease is caused by inhalation of contaminated aerosols with Legionella from a variety of water sources. The aim of this study was to characterize the rate of contamination of environmental and hospital water sources by legionella spp in Ahvaz by using standard culture method and polymerase chain reaction (PCR). Materials and methods A total of 100 water samples were collected from environmental and hospital sources in Ahvaz. After decontamination with Hcl-Kcl treatment, samples were centrifuged and inoculated on to buffered charcoal yeast extract agar (BCYE) and MWY media. In order to confirmation of bacterial colonies as legionella, DNA was extracted and 16S rRNA was amplified using PCR. Results Out of 100 samples, 15% were positive for Legionella by culture method. Among positive cultures 8% and 7% were obtained from hospital and enviromental water sample,respectively . By PCR all of the positive cultures had 16srRNA and confirmed as Legionella Spp. Conclusion According to the study results, despite of using purification water 15% of water samples were contaminated with Legionella spp. In order to control and prevention of spread of Legionella spp, disinfection of water sources is necessary.