تعيين ژنوتيپ ايزوله هاي گوسفندي و انساني كيست هيداتيد در ايلام

Determination of Genotype Isolates of Human and Sheep Hydatid Cyst in Ilam

مقدمه: بيماري اكينوكوكوزيس يكي از مهم ترين بيماري هاي مشترك بين انسان و حيوان در بسياري از مناطق دنيا از جمله ايران است كه توسط مرحله لاروي كرم اكينوكوكوس گرانولوزوس ايجاد مي گردد. اين انگل از تنوع ژنتيكي بسيار بالايي برخوردار است و شامل كمپلكسي از ژنوتيپ (استرين) هاي مختلف است. معمولاً در مناطقي كه بيماري آندميك است، تنوع ژنتيكي نسبتاً زيادي در انگل از لحاظ بيولوژي وجود دارد. تحقيقات انجام شده در مناطق مختلف دنيا نشان مي دهد كه تنوع ژنوتيپي و ماهيت كمپلكس اكينوكوكوس گرانولوزوس، بر چرخه زندگي انگل، مسيرهاي انتقال، بيماريزايي، آنتي ژنيسيتي، ايمني زايي، پاسخ به داروها، همه گير شناسي و كنترل اين بيماري تأثيرگذار است. اين مطالعه براي اولين بار با هدف تعيين ژنوتيپ ايزوله هاي گوسفندي و انساني كيست هيداتيد در استان ايلام انجام شد. مواد و روش ها: تعداد 20 نمونه كيست هيداتيد گوسفندي از كشتارگاه صنعتي ايلام و 10 نمونه انساني از بيمارستان هاي شهرستان ايلام جمع آوري شد. پس از استخراج DNA ژنومي پروتواسكولكس ها، نواحي mitDNA NADH dehydrogenase subunit 1 (nad1) توسط PCR تكثير و محصولات PCR با استفاده از روش PCRRFLP آناليز شدند. يافته هاي پژوهش: بر اساس نتايج به دست آمده، اندازه قطعاتnad1 تكثير يافته، bp 550 بود. الگوهاي قطعات به دست آمده از محصول PCR بعد از برش با آنزيم هاي AluI و RsaI نشان داد كه تمامي نمونه ها، الگوي RFLP مشابه داشتند و با آنزيم HpaII نيز هيچ گونه برشي ايجاد نگرديد. بحث و نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه تشابه ژنوتيپي بين اندازه قطعات باندهاي DNA اكينوكوكوس گرانولوزوس ايزوله هاي مختلف انساني و گوسفندي با روش PCR-RFLP بيانگر وجود ژنوتيپ هاي متشابه انگل در منطقه ايلام است و حداقل يك ژنوتيپ از انگل حضور دارد كه ژنوتيپ G1 يا همان استرين شايع گوسفندي متعلق به كمپلكس اكينوكوكوس گرانولوزوس سنسو استريكتو (G1-G3) مي باشد.

Introduction: Echinococcosis disease is one of the most common diseases of human and animals in many parts of the world, including Iran, which is caused by larval stage of Echinococcus granulosus. This parasite has a high genetic diversity and including a complex of different genotypes (strains). Usually in areas where disease is endemic, there is a relatively high genetic diversity in parasite biologically. Studies in different parts of the world demonstrate that genotype variation and the nature of E.granulosus influenced on the life cycle of parasite, transmission routes, pathogenesis, and antigenicity, immunogenicity, response to medication, epidemiology and control of the disease. The aim of present study was to determination of genotype isolates of human and sheep hydatid in Ilam province for the first time. Materials methods: 20 hydatid cyst sles were collected from sheep Ilam Industrial slaughterhouses and 10 human sles from Ilam hospitals. After DNA extraction of protoscoleces, mitDNA NADH dehydrogenase subunit 1 (nad1) areas was lified by PCR and the PCR products were analyzed by PCRRFLP. Findings: Based on the results which obtained, the size of proliferative nad1 products was 550 base pairs. Patterns of parts which obtained from PCR products after cutting by AluI and RsaI enzymes showed that all sles had a similar RFLP pattern but HpaII enzyme did not cut any region and had no change in fragment size. Discussion Conclusion: The results of this study indicated that genotypic similarities between the size of DNA bands of E. granulosus from human and sheep isolates with PCRRFLP method indicated the occurrence of similarities genotypes of E.granulosus in Ilam region. There is at least one genotype of parasite, which belongs to E. granulosous sensu stricto (G1G3) complex.