القاي جنين زايي سوماتيكي مستقيم از جداكشت برگ در نارون ملج (Ulmus glabra)

Induction of direct somatic embryogenesis in leaf explants of Ulmus glabra

نارون ملج (Ulmus glabra) گونه اي جنگلي است كه از لحاظ اقتصادي ارزش بالائي دارد اما به دليل حساسيت به بيماري مرگ هلندي نارون در معرض نابودي قرار گرفته است. به همين دليل تكثير درون شيشه اين گياه جهت اصلاح ژنتيكي آن حائز اهميت است. در اين تحقيق براي اولين بار جنين هاي سوماتيك كروي شكل بطور مستقيم از جداكشت برگ گياهان درون شيشه اي به دست آمد. در آزمايش اول ريزنمونه هاي دو ژنوتيپ مختلف بر روي محيط MS حاوي BA يا Kin و يا TDZ در شرايط نوري كشت شدند. آزمايش دوم شامل محيط MS حاوي 200 ميلي گرم در ليتر كازئين هيدروليزات به همراه غلظت هاي متفاوتي از 2,4D و Kin در شرايط تاريكي بود. در آزمايش سوم محيط MS ½ همراه با 200 ميلي گرم در ليتر كازئين هيدروليزات و سطوح پايين 2,4D به همراه سطوح مختلف Kin در شرايط نور يا تاريكي آزمون گرديد. جنين هاي سوماتيك كروي شكل به صورت مستقيم در تيمارهاي آزمايش سوم و در ژنوتيپ شماره دو توليد شد. درصد جنين زايي در اكثر تيمارهاي آزمايش سوم صد در صد بود اما بالاترين ميانگين تعداد جنين به ازاي هر جداكشت مربوط به تيمار 2/0 ميلي گرم در ليتر 2,4D (48/60) و تيمار 4/0 ميلي گرم در ليتر 2,4D همراه با 2/0 ميلي گرم در ليتر Kin (76/47) مي باشد. نتايج نشان داد كه درصد جنين زايي و ميانگين تعداد جنين به ازاي هر جداكشت در شرايط تاريكي در مقايسه با شرايط نوري بسيار بالاتر بود.

Ulmus glabra is a economical important tree species found in forests. However it is endangered due to high susceptibility to Dutch Elm Disease. Therefore, an efficient micropropagation method is important for breeding and genetic improvement of elm. This is the first report on induction of direct somatic embryogenesis from in vitro leaf explants in elm. The first experiment conducted with MS medium supplemented with different concentrations of BA or Kin or TDZ under light condition. Second experiment, carried out with MS basal media supplemented with 200 mg l–1 casein hydrolysed and different levels of 2,4D and Kinetin in darkness. In third experiment 1/2 MS media supplemented with 200 mg l–1 casein hydrolysed and low levels of 2,4D in combination with Kin were used, and the effects of light and darkness were investigated. Globular somatic embryos were achieved directly just on small leaves of genotype 2 in experiment 3. Nonembryogenic calli were induced in other experiments. The frequency of embryogenesis in most of the treatments of experiment 3 was 100%. However high number of embryos per explants was achieved in presence of 0.2 mgl1 2,4D without Kin (60.48) and 0.4 mgl1 2,4D combined with 0.2 mgl1 Kin (47.76). Additionally, the percentage of embryogenesis and the average number of embryos per explants were higher in dark compared to the light condition.