جداسازي و شناسايي مولكولي مايكوپلاسما پالمونيس از دستگاه تنفسي موش صحرايي رت

Isolation and molecular identification of Mycoplasma pulmonis from the respiratory tract of Rattus rattus

زمينه و هدف: مايكوپلاسماها كوچك ترين باكتري هاي خود تكثير پلئومورف با قطري در حدود 200-500 نانومتر و فاقد ديواره سلولي هستند. به دليل اندازه كوچك و انعطاف پذيري ساختار آن ها به راحتي از فيلترهاي غشايي عبور كرده و سبب آلودگي مي گردند. اين ميكروارگانيسم هاي منحصربه فرد در طبيعت عامل طيف وسيعي از بيماري ها در ميان جانداران به خصوص بيماري هاي تنفسي و تناسلي در ميان جوندگان است. هدف از انجام اين مطالعه جداسازي و شناسايي مولكولي مايكوپلاسما از موش هاي نژاد رت است. روش ها: به منظور جداسازي مايكوپلاسما پالمونيس، نمونه هاي ناي جمع آوري و روي محيط Medium 243 كشت داده شده و در محيط ميكروآئروفيل قرار داده شد. از باكتري هاي رشد كرده DNA كروموزومي جدا كرده و بعد از PCR بر روي ژن 16s rRNA آن، محصول PCR تعيين ترادف بازي گرديد و درنهايت جهت شناسايي دقيق باكتري جداشده، ترادف بازي مورد BLAST قرار گرفت. يافته ها: باكتري هاي جداسازي شده ازنظر ماكروسكوپي، بر روي محيط كشت اختصاصي (Medium 243) كلني هايي به فرم زرده تخم مرغي ايجاد كرد. نتيجه بررسي تعيين ترادف بازي ژن 16srRNA نشان داد كه باكتري جداشده متعلق به جنس مايكوپلاسما است و داراي 99% شباهت به گونه مايكوپلاسما پالمونيس است. نتيجه گيري: با توجه به عدم شباهت 100%، باكتري جداشده سويه جديد است با نام مايكوپلاسما پالمونيس سويه IRMT179 نام گذاري گرديد و درنهايت در بانك ژن جهاني با شماره دسترسي 836312KP ثبت گرديد. اين مطالعه اولين تحقيق در خصوص جداسازي مايكوپلاسما پالمونيس از سيستم تنفسي موش هاي نژاد رت شهري در كشور است.

Background and Aim: Mycoplasma is the smallest selfreplicating bacteria polymorphic are having a diameter of about 200500 nm, and lees cell wall. Because of their small size and flexibility to easily pass through the filter membrane and contaminate represented. These organisms are unique in nature, the wide range of diseases among animals, especially respiratory genitalia diseases were among the rodents.The aim this study was to isolate and identify the molecule Mycoplasma of Rats. Methods: With aim to isolation of mycoplasmas pulmonis, the tracheal sles were collected and cultured on the medium 243 and Microaerophilic was placed. Genomic DNA was isolated from bacteria grown. 16srRNA gene lified with PCR. The PCR products, finally to identify the bacteria was purified, sequenced were a BLAST. Results: Macroscopic studies on the isolated colonies showed fried egg colonies were established. Based on the 16SrRNA sequencing studies, this bacterium belonging Mycoplasma genus had 99% similarity to Mycoplasma pulmonis. Conclusions: Due to the lack of similarity of 100%, a new strain of bacterium, Mycoplasma pulmonis strain IRMT179 name were called. Finally, the gene bank was recorded with acceptation number KP836312. This study is the first time in Iran Mycoplasma pulmonis was isolated from the respiratory tract an urban rat.