جداسازي و شناسايي باكتري‌هاي لاكتوباسيلوس با پتانسيل پروبيوتيكي از لبنيات سنتي كرمان

Isolation and identification of Lactobacillus bacteria with probiotic potential from traditional dairy in Kerman

زمينه و اهداف: لاكتوباسيلوس ها متداول ترين سويه هاي پروبيوتيكي هستند كه داراي خصوصيت ضدميكروبي نيز مي باشند. هدف از اين پژوهش، مطالعه خصوصيت پروبيوتيكي و اثر ضدميكروبي لاكتوباسيلوس هاي بومي جدا شده از لبنيات مي باشد. مواد و روش ها: در اين تحقيق 26 سويه لاكتوباسيلوس از نمونه هاي شير، ماست و پنير بومي، جداسازي شدند. تمامي جدايه ها ازنظر مقاومت به اسيد (pH هاي 2، 3 و 4) و غلظت هاي نمك هاي صفراوي (0/3، 0/5 و 1% وزني/حجمي) مورد بررسي قرار گرفتند. اثر ضد ميكروبي اين جدايه ها بر روي باكتري هاي پاتوژن ليستريا منوسيتوژنز، انتروكوكوس فكاليس، اشريشيا كلي PTCC 1330، استافيلوكوكوس اورئوس PTCC 1112 و باسيلوس سرئوسPTCC 1015 با استفاده از روش چاهك، مطالعه شد. سپس سويه هاي مقاوم به شرايط اسيدي و نمك هاي صفراوي كه اثر ضدميكروبي خوبي از خود نشان دادند، توسط توالي يابي ژن 16S rRNA شناسايي شدند. يافته ها: در پژوهش حاضر 96/15% جدايه ها توانستند رشد باكتري هاي پاتوژن را مهار نمايند. 61/5% جدايه ها به 2 pH و 84/62% به غلظت 0/3% نمك صفراوي مقاوم بودند ولي تنها دو سويه 53C و 22CL بيشترين تحمل را در شرايط اسيدي و غلظت بالاي نمك هاي صفراوي از خود نشان دادند. بر اساس آناليز فيلوژنتيكي بر پايه توالي يابي 16S rRNA مشخص گرديد اين دو سويه به گونه لاكتوباسيلوس كازئي تعلق دارند. بحث: بر اساس يافته هاي به دست آمده مي توان از دو سويه مقاوم جدا شده به عنوان آغازگرهاي پروبيوتيكي در تهيه فراورده هاي لبني پروبيوتيك، استفاده نمود.

Background: As lactobacilli possess an antagonistic growth property, therefore they may be used as bioprotective agents for infection control. The aim of this study was to investigate the antagonistic effect of lactobacilli isolated from local dairy. Materials and Methods: In this study 26 species of Lactobacilli were isolated from milk, homemade yoghurt and cheese. Each isolated bacteria was tested for its tolerance to acidic environments at pH (2.0, 3.0, and 4.0) and bile salt concentrations (0.3, 0.5 and 1% w/v). Also, isolates were further tested for their antimicrobial activity against common pathogenic bacteria such as Enterococcus feacalis, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus PTCC 1112, Escherichia coli PTCC 1330 and Bacillus cereus PTCC 1015 by using the agar well method. Then the strains that are not only resistant to acidic conditions and bile salts but also have antimicrobial activity, were identified by 16S rRNA gene sequencing. Results: In this study, most of isolated Lactobacilli were found to inhibit growth of pathogens (96.15%). 61.5% and 84.62% of isolated lactobacilli tolerated to pH 2 and 0.3% bile salt. Only two strains, 53C and 22CL, were more resistant to pH 2 and high concentration of bile salt. The Phylogenetic analysis based on 16S rRNA sequencing revealed that two strains (53C and 22CL) belong to species of Lactobacillus casei. Conclusions: According the results the two isolated resistant strains can be employed as probiotic starter in probiotic dairy products preparation.