بررسي وجود ژن‌هاي blaTEM، blaCTX-M و blaSHV در نمونه‌هاي اشريشيا كلي جداشده از طيور به روش Multiplex-PCR و تعيين الگوي حساسيتي اين سويه‌ها در استان كرمان

Detection of bla TEM, bla CTX-M and blaSHV in Escherichia coli isolated from poultry by multiplex-PCR and determination of the strains susceptibility profile in Kerman province

     كلی باسیلوز یك بیماری شایع در واحدهای پرورش مرغ های گوشتی بوده كه بواسطه مقاومت باكتریائی و استفاده بی‌رویه از داروها طی سالیان متمادی تلفات و خسارات زیادی را به بار آورده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی وجود ژن‌های bla TEM,   bla CTX-M و bla SHV در نمونه‌های اشریشیا كلی جدا شده از طیور به روش Multiplex-PCR و تعیین الگوی حساسیت آنتی بیوتیكی این سویه‌ها می‌باشد. در مجموع تعداد 60 جدایه اشریشیا كلی از نمونه‌های مدفوعی طیور بدست آمد. تست حساسیت آنتی بیوتیكی بر طبق دستورالعمل CLSI و براساس روش انتشار در ژل تعیین شد. DNA سلولی با استفاده از كیت DNA-سیناژن (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF) استخراج و PCR چندگانه به منظور شناسایی ژنهایCTX-M, SHV و TEM انجام شد. نتایج تست حساسیت آنتی‌بیوتیكی نشان داد كه، كمترین و بیشترین میزان مقاومت به ترتیب مربوط به ایمی پنم (0%) و آزترونام (77%) بود. 41 (68.3 %) سویه دارای ژن CTX-M، 28 (46.6 %) سویه دارای ژن TEM بودند. هیچ كدام از نمونه‌ها دارای ژن SHV نبودند. 16 سویه (26 %) به طور همزمان دارای ژن‌های TEM و CTX-M بودند. روش دیسك دیفیوژن برای تشخیص آزمایشگاهی حضور ESBLs، روشی بسیار كاربردی و مقرون به صرفه می‌باشدكه می‌تواند با توجه به اهمیت ارگانیسم‌های تولیدكننده ESBLs به آزمون‌های روتین اضافه گردد. در ضمن، برای تعیین ژنوتیپ می‌توان از آزمون PCR استفاده كرد.

Colibacillosisis one of the common illness in the Broiler chicken farms that increase resistance and overuse of drugs in recent years has brought a lot of losses. The aim of the current study was the detection of bla TEM, bla CTX-M and bla SHV in Escherichia coli isolated from poultry by multiplex-PCR and their antibiotic susceptibility profile. A total of 60 isolates of E. coli were collected from the poultry. The antibiotic susceptibility test was determined using the disk diffusion method agreeing with CLSI guideline. Cellular DNA was extracted by CinnaPure-DNA (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF) and MPCR was performed for the identification of the CTX-M, SHV and TEM genes.The antibiotic susceptibility test results showed that, the lowest and highest resistance rate were related to imipenem (0%) and aztronam (77%) , respectively. 41(68.3%) , 28(46.6%) and 0(0.0%) strains were positive for CTX-M, TEM and SHV, respectively. 16(26%) isolates carry out both TEM and CTX-M. Disk diffusion method for laboratory diagnosis of ESBLs is highly functional and cost-effective method that can be given to the importance of ESBLs-producing organisms to test routine is added. In addition, PCR assay for genotyping can be used.