عنوان مقاله :
بهبود توليد رده‌هاي سلولي پرتوان هاپلوئيد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك موش به واسطه مهار همزمان مسيرهاي پيام‌رساني MEK و TGFβ
عنوان به زبان ديگر :
Production Improvement of Derived Haploid Mouse Embryonic Stem Cells from Parthenogenetic Mouse Blastocysts by Simultaneous Suppression of TGF-Β and ERK Signaling Pathways
پديد آورندگان :
ملامحمدي، سپيده نويسنده دانشكده علوم پايه,گروه زيست‌شناسي تكويني,دانشگاه آزاد اسلامي واحد دامغان,دامغان,ايران M, S , شيروي، عبدالحسين نويسنده دانشكده علوم پايه,گروه زيست‌شناسي تكويني,دانشگاه آزاد اسلامي واحد دامغان,دامغان,ايران SH, A , حسني، نفيسه نويسنده گروه سلولهاي بنيادي و زيست‌شناسي تكويني تهران,پژوهشگاه رويان,ايران H, SN , بهاروند، حسين نويسنده گروه سلولهاي بنيادي و زيست‌شناسي تكويني تهران,پژوهشگاه رويان,ايران B, H
اطلاعات موجودي :
فصلنامه سال 1394
كليدواژه :
جنين پارتنوژنتيك موش , سلولهاي بنيادي جنيني هاپلوئيد , مسير پيام‌رساني ERK و TGF-β
چكيده فارسي :
هدف: در اين طرح توليد سلولهاي بنيادي جنيني هاپلوئيد پارتنوژنتيك در حضور مهاركننده‌هاي مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ بررسي شده است. مواد و روش‌ها: ابتدا بلاستوسيست‌هاي پارتنوژنتيك حاصل از فعال‌سازي شيميايي اووسيت‌ها، در محيط R2i (حاوي PD0325901 و SB431542 كه بهترتيب مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ را مهار مي‌كنند) كشت شدند. سپس رده‌هاي سلولهاي بنيادي جنيني پارتنوژنتيك در اين محيط تكثير و نگهداري شدند. با استفاده از رنگ‌آميزي ايمونوفلورسانس و qRTPCR، بيان ماركرهاي پرتواني و با روش تمايز خودبهخودي و ايجاد تراتوما پتانسيل تمايزي اين سلول‌ها ارزيابي شدند. ميزان هاپلوئيدي نيز با استفاده از روش فلوسايتومتري تعيين گرديد. نتايج: در شرايط R2i، حدود 50 درصد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك، رده سلولي توليد كردند و 10 تا 13 درصد سلولهاي هر رده به‌صورت هاپلوئيدي بودند. سلولهاي بنيادي پارتنوژنتيك توليد شده در محيط R2i ويژگي‌هاي سلولهاي بنيادي پرتوان مانند مورفولوژي، پاساژپذيري، بيان ژن‌هاي ويژه پرتواني در سطح mRNA و پروتئين را نشان دادند. همچنين اين سلول‌ها قادر به تمايز خودبهخودي به مشتقات سه لايه زاينده جنيني و ايجاد تراتوما بودند. نتيجه‌گيري: مهار مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ مي‌تواند شرايط مناسبي را براي توليد سلولهاي بنيادي هاپلوئيد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك فراهم كند.
چكيده لاتين :
Aim: In this project, production of haploid parthenogenetic embryonic stem cells has been studied in presence of the ERK and TGFβ signaling pathway inhibitors. Material and Methods: First the parthenogenetic blastocyst produced with chemical activation of oocytes was cultured in R2i culture condition (containing PD0325901 and SB431542 which inhibit ERK and TGFβ signaling pathways respectively). Then parthenogenetic embryonic stem cell lines was subsequently expanded and preserved in the same culture medium. Using immunofluorescent staining and qRTPCR, expression of the pluripotent markers were evaluated. Moreover, differentiation potential of these cells was assessed by spontaneous differentiation and teratoma formation assay. Degree of haploid in this cell lines was determined by flowcytometry methods. Results: In R2i culture condition, about 50% of parthenogenetic embryos produce cell lines, out of which 1013% are haploid. Established parthenogenetic stem cell lines demonstrate pluripotent stemness characteristics including morphology, passagability as well as expression of pluripotent specific genes in mRNA and protein levels. In addition, these cells were able to differentiate spontaneously to embryonic germ layers and form teratoma. Conclusion: Inhibition of ERK and TGFβ signaling pathways can provide an appropriate condition for producing haploid stem cells from parthenogenetic embryos.
عنوان نشريه :
سلول و بافت
عنوان نشريه :
سلول و بافت
اطلاعات موجودي :
فصلنامه با شماره پیاپی سال 1394
كلمات كليدي :
#تست#آزمون###امتحان
