پديد آورندگان :
فيروزبخت، حسين نويسنده گروه گياه پزشكي، دانشكده علوم كشاورزي، دانشگاه گيلان، رشت-ايران , , زيبايي، آرش نويسنده گروه گياه پزشكي، دانشكده علوم كشاورزي، دانشگاه گيلان، رشت-ايران , , سوهاني، محمد مهدي نويسنده گروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشكده علوم كشاورزي، دانشگاه گيلان، رشت-ايران , , هدي، حسن نويسنده بخش كنترل بيولوژيك، موسسه تحقيقات گياه پزشكي، آمل-ايران ,
كليدواژه :
ايمني سلولي , فنل اكسيداز , Andrallus spinidens , BEAUVERIA BASSIANA
چكيده فارسي :
در اين پژوهش، تاثير دو جدايه از قارچ بيمارگر Beauveria bassiana Boisduval بر سامانه ايمني افراد بالغ سن شكارگر Andrallus spinidens Fabricius (Hemiptera: Pentatomidae) مورد بررسي قرار گرفت. چهار نوع سلول خوني در همولنف حشره بالغ شناسايي شد كه شامل پروهموسيت‌ها، پلاسموتوسيت‌ها، گرانولوسيت‌ها و اوونوسيت‌ها بودند. همچنين تاثير دو جدايه قارچ B. bassiana و لاتكس بيد روي ايمني سلولي و فعاليت فنل اكسيداز مورد بررسي قرار گرفت. بيشترين تعداد سلول خوني شمارش شده به ترتيب 48، 48، 12 و 12 ساعت پس از آلودگي، در تويين (شاهد)، لاتكس بيد، جدايه BB2 و جدايه AM-118 به دست آمد. بيشترين تعداد پلاسماتوسيت ها نيز در 48، 48، 24و 3 ساعت پس از آلودگي در تويين (شاهد)، لاتكس بيد، جدايه BB2 و جدايه AM-118 و بيشترين تعداد گرانولوسيت ها نيز به ترتيب در 48، 48، 12 و 12 ساعت پس از آلودگي مشاهده شد. بيشترين ميزان گره نيز به ترتيب در 48، 48، 12 و6 ساعت پس از آلودگي و در مورد فعاليت فنل اكسيداز هم بيشترين فعاليت 6 ساعت پس از آلودگي در تويين، جدايه BB2 و جدايه AM-118 و 3 ساعت پس از آلودگي براي لاتكس بيد مشاهده شد. جهت تعيين ژن توليد كننده پيش فنل اكسيداز، RNA سلول هاي خوني استخراج شده و پس از سنتز cDNA، ژن مذكور با استفاده از يك جفت آغازگر رفت و برگشت دژنره تكثير شد. نتيجه نشان دهنده محصولي با 675 جفت باز بر مبناي خوانش برگشت بود كه با پيش فنل اكسيداز سن Anasa tristis De Geer تشابهي 66 درصدي داشت. نتايج اين پژوهش نشان مي-دهند كه پاسخ هاي ايمني سن شكارگر به جدايه هاي مختلف قارچ B. bassiana متفاوت است، بنابراين در برنامه هاي مديريت تلفيقي بايد از جدايه هايي استفاده كرد كه براي شكارگر بيمارگري كمتري داشته باشند.
چكيده لاتين :
In this study, the effects of two isolates from the entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana Boisduval were determined in immune system of the predatory hemipteran, Andrallus spinidens Fabricius (Hemiptera: Pentatomidae). Four types of hemocytes were identified in the hemolymph of the adult bug including prohemocytes, plasmatocytes, granulocytes and oenocytoids. Also, the effects of two entomopathogenic fungus isolates and latex bead were studied on the activity of phenoloxidase. The highest number of total hemocytes were found at time intervals of 12, 12, 48 and 48 hours post-injection by Tween80 (Control), latex bead, BB2 and AM-118, respectively. The highest number of plasmatocytes were determined 48, 48, 24 and 3 hours post-injection by Tween80 (Control), latex bead, BB2 and AM-118 but the number of granulocytes were observed after 48, 48, 12 and 12 hours, respectively. The highest number of nodules were observed 48, 48, 12 and 6 hours post-injection Tween80 (Control), latex bead, BB2 and AM-118, respectively. The highest activity of phenoloxidase were determined 6 hours post-injection by Tween80 (Control), BB2 and AM-118 and 3 hours post-injection by Tween80, respectively. To determine the gene of proPhenoloxidase, RNAs of the hemocytes were extracted and it was amplified by a pair of degenerate forward and reverse primers followed by cDNA synthesis. The results revealed a product with 675 bp based on reverse sequencing which had a 66% similarity with prophenoloxidase of Anasa tristis De Geer. Results of this study demonstrate that immune responses of the predacious hemipteran are different regarding various isolates of B. bassiana so the isolates should be used which have the lower virulence against the predator in integrated pest management programs.
