تاثير عصاره بخش‌هاي هوايي گياه اُرس (Juniperus excelsa) بر تكثير و مرگ سلول‌هاي سرطاني لوسمي لنفوبلاستيك حاد رده‌هاي Nalm - 6 و Reh

The effect of extract from aerial parts of Juniperus excelsa plant on proliferation and apoptosis of acute lymphoblastic leukemia cell lines, Nalm-6 and Reh

چكيده سابقه و هدف لوسمي لنفوبلاستيك حاد(ALL)، شايع‌ترين بدخيمي در كودكان است. به دليل اثرات جانبي فراوان داروهاي شيمي‌درماني، استفاده از تركيبات طبيعي مورد توجه قرار گرفته است. اُرس يك گياه دارويي است كه اثر مهاري عصاره آن بر روي چندين رده سلولي سرطاني گزارش شده است. هدف از اين مطالعه، بررسي اثر كشندگي و آپوپتوتيك عصاره بخش‌هاي هوايي گياه اُرس بر رده‌هاي سلولي ALL ( Nalm-6 و Reh) بود. مواد و روش‌ها در اين مطالعه بنيادي سلول‌هاي Nalm-6 و Reh بعد از كشت سلولي با غلظت‌هاي مختلف عصاره تيمار شده و با آزمون MTT ، درصد سلول‌هاي زنده بعد از 48 و 72 ساعت انكوباسيون بررسي شد. جهت درك مكانيسم مرگ سلولي از آزمون فلوسيتومتري Annexin V-FITC و سنجش فعاليت كاسپاز 3 استفاده شد. آناليز آماري داده‌ها با استفاده از آزمون one-way ANOVA و 23 SPSS انجام گرفت. يافته‌ها نتايج حاصل از آزمون MTT نشان داد كه غلظت‌هاي 3، 4 و 5 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر عصاره در هر دو رده سلولي، موجب كاهش معنادار درصد سلول‌هاي زنده مي‌شود(001/0 p < ). هم چنين نتايج حاصل از فلوسيتومتري حاكي از افزايش قابل توجه آپوپتوز در سلول‌هاي تيمار شده نسبت به گروه كنترل بود(001/0 p < ). در آزمون سنجش فعاليت كاسپاز 3 نيز افزايش قابل توجه فعاليت آن در سلول‌هاي تيمار شده نسبت به گروه كنترل مشاهده شد(05/0 p < ). نتيجه گيري با توجه به نتايج، عصاره بخش‌هاي هوايي گياه اُرس داراي اثرات كشندگي و آپوپتوتيك بر سلول‌هاي سرطاني رده Nalm-6 و Reh بودند.

Abstract Background and Objectives Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common childhood malignancy. The side effects of chemotherapeutic drugs have primarily lead to the increased use of natural products for cancer treatment. Juniperus excelsa, a medicinal herb, was reported to show antiproliferative effects on various cancer cells. In this study, cytotoxic and apoptotic effects of extract from aerial parts of Juniperus excelsa plant were investigated on acute lymphoblastic leukemia cell lines, Nalm-6 and Reh. Materials and Methods In this basic research, Nalm-6 and Reh were cultured and then they were treated with various concentrations of J. excelsa extract for 48 and 72 h and then the cell viability was evaluated by using MTT assay. Apoptosis also was assessed by caspase 3 activity assay and flow cytometry following Annexin V and Propidium iodide staining. Statistical analysis was assessed by one-way ANOVA test and SPSS 23. Results MTT assay results show that J. excelsa extract concentrations of 3, 4 and 5 µg/ml significantly reduce percentage of alive cells (p < 0.001). Flow cytometry results also show that J. excelsa extract significantly increase percentage of apoptotic cells compared with control groups (p < 0.001). Caspase 3 activity assay results show that caspase 3 activity was significantly increased in treated cells (p < 0.05). Conclusions Our study shows that extract from aerial parts of J. excelsa has cytotoxic and apoptotic effects on Nalm-6 and Reh cells.