مقايسه توكسيسيته فراورده گياهي SIM5 و فراكشن هاي آن بر سلول‌هاي طبيعي در حال استراحت، فعال و سلول سرطاني

Comparison of toxic effects of SIM5 and its fractions on normal resting, activated and cancerous cells

مقدمه و هدف: بسياري از داروهاي ضدسرطاني، هم سلول‌هاي سالم و هم سلول‌هاي سرطاني را هدف مي گيرند. باتوجه‌به اهميت تكثير سلولي در مراحل فعال‌شدن لنفوسيت‌ها، تركيبات ضدسرطاني كه بر سلول‌هاي نرمال در حال تكثير اثر نامطلوب نداشته باشند، بسيار ارزشمند هستند. اثر توكسيك فراورده گياهي SIM5 بر برخي سلول‌هاي سرطاني گزارش شده، ولي تاثير آن بر سلول‌هاي طبيعيِ در حال تكثير مشخص نيست. مطالعه حاضر به‌منظور مقايسه كامل‌تر اثر اين فراورده و فراكشن‌هاي آن بر سلول‌هاي طبيعي در حال استراحت و در حال تكثير و نيز رده سرطاني طراحي شده ‌است. مواد و روش‌ها: رده سلولي BCL1 (سرطاني) و سلول‌هاي طحال موش (طبيعي در حال استراحت) كشت داده شدند. به نيمي از چاهك‌ها محرك (ConA يا LPS) اضافه شد (طبيعي در حال تكثير) و به‌مدت 48 ساعت با غلظت‌هاي مختلف SIM5 و يا فراكشن‌هاي آن (بر اساس وزن ملكولي تقريبي) مجاور شدند؛ سپس تست MTT انجام شد و ميزان توكسيسيته و IC50 محاسبه گرديد. نتايج: بااينكه SIM5 اثر توكسيك قوي بر رده سرطاني BCL1 داشت (از 2 تا 2/0 با IC50 حدود 41/0 ميلي‌گرم در ميلي ليتر)، ولي بر لنفوسيت‌هاي فعال‌شده اثر توكسيك نداشته، به‌علاوه توانست لنفوسيت‌هاي طبيعي در حال استراحت را فعال نمايد. بهترين تاثير ضدسرطاني در محدوده وزن ملكولي 30-50 كيلودالتون (IC50 حدود 1 ميكروگرم در ميلي ليتر) و بهترين اثر فعاليت سلولي در محدوده 10-30 كيلودالتون مشاهده شد. نتيجه‌گيري: اثر فراورده گياهي SIM5 بر سلول‌هاي سرطاني، طبيعيِ در حال استراحت و طبيعيِ در حال تكثير متفاوت است. جست‌وجوي مكانيسم‌هاي احتمالي افتراق آن مي‌تواند راهگشاي استفاده از اين فراورده به‌عنوان داروي ضدسرطاني باشد.

Background and Objective: Common anticancer drugs have adverse effects due to targeting both normal and cancerous cells, so it seems valuable to search for further new anticancer compounds. Previously reported, herbal preparation SIM5 has toxic effect on cancerous cells, although its effect on normal proliferating cells is not clear. The present study was performed in order to further comparing the effects of the preparation and its fractions on normal resting, proliferating cells and cancerous cells. Materials and Methods: The BCL1 cell line (cancerous) and mouse splenocytes (normal resting) were cultured, the stimulator (ConA or LPS) was added to half of the wells (normal proliferating). Then, incubated with various concentrations of SIM5 or its fractions (according to relative molecular weight) for 48 hours, MTT test was performed and the cytotoxicity and IC50 were calculated. Results: SIM5 had strong toxic effect on BCL1 (from 0.2-2 mg/ml, IC50 about 0.41 mg/ml), however no toxic effect was observed on activated lymphocytes. Besides, it was able to activate normal resting lymphocytes. The most effective anti-cancer fractions lie between the molecular weight of 30-50 KDa and the best immune-activating effect was between of 10-30 KDa. Conclusion: The herbal preparation SIM5 has distinct effects on cancerous cells, lymphocytes and normal proliferating cells, so seeking possible discriminative mechanisms may clarify its potency as a candidate anti-cancer drug. Keywords: Cytotoxicity, SIM5, BCL1 cell line, Mice lymphocyte, Proliferative activity