بررسي اثر سلنيت سديم بر فعاليت آنزيم تلومراز و طول تلومر در سلولهاي مزانشيمي مغز استخوان رت هاي پير در محيط كشت

An in vitro study of the effect of sodium selenite on telomere length and telomerase activity of bone marrow stromal cells in aged rats

چكيده زمينه و هدف: با افزايش سن موجود زنده، تعداد سلول هاي مزانشيمي مغز استخوان و نيز قدرت تكثير و تمايز اين سلول ها كاهش مي يابد. اين تغييرات منجر به كاهش اثر بخشي اين سلول ها در سلول درماني اتولوگ افراد پير مي شود.هدف مطالعه حاضر بهبود بخشي سلول هاي مزانشيمي مغز استخوان رت هاي پير است. روش بررسي: سلول هاي مزانشيمي مغز استخوان رت هاي پير به مدت 72 ساعت در معرض غلظت هاي مختلف سلنيت سديم قرار داده شدند. ارزيابي اثر سلنيت سديم بر قدرت تكثير اين سلول ها با استفاده ازتست تريپان بلو انجام شد. سپس اثر غلظت موثر سلنيت سديم بر فعاليت آنزيم تلومراز، بيان ژن هاي مرتبط با فعاليت اين آنزيم و نيز طول تلومر بررسي شد. بررسي فعاليت آنزيم تلومراز به روشPCR- ELISA انجام گرديد و براي اندازه گيري طول تلومر و بيان ژن ها از روش Real time PCR استفاده شد يافته ها: سلنيت سديم در غلظت 100 نانو مولار بطور معني دار تكثير سلولي سلول هاي مزانشيمي رت هاي پير را افزايش و طول تلومر اين سلول ها را كاهش داد، البته كاهش طول تلومر اين سلول ها در مقايسه با گروه كنترل معني دار نبود. فعاليت آنزيم تلومراز و بيان ژن هاي وابسته به آن نيز تغيير نيافت. نتيجه گيري: سلنيت سديم قدرت تكثير سلول هاي مزانشيمي مشتق از رت هاي پير را بهبود مي بخشد. كليد واژه ها : سلنيت سديم، پيري ، سلول هاي مزانشيمي، تلومر، تلومراز

ABSTRACT Background and Aim: The number and potential of proliferation and differentiation of bone marrow mesenchymal stromal cells decreases with age. These changes reduce efficacy of autologous transplantation in old people. The purpose of this study was to evaluate the effect of sodium selenite on telomere length and telomerase activity of bone marrow stromal cells (BMSCs) in aged rats. Material and Methods: The BMSCs collected from aged male rats were cultured and treated with different concentrations of sodium selenite for 72 h. We evaluated the effect of sodium selenite on the proliferation potential of these cells using trypan blue exclusion test. Then, we evaluated the efficacy of the effective concentration of sodium selenite on telomerase activity, telomere length and the related telomerase gene expression. Telomerase activity was assessed byPCR-ELSA method and telomere length, and its related gene expression were assessed by the real time PCR technique. Results: Use of sodium selenite at the concentration of 100nM led to significant increase in the proliferation of BMSCs and decreased telomere length in the aged rats compared to the control group, although the difference was not significant. Telomerase activity and the related telomerase gene expression did not show any change. Conclusion: Sodium selenite improved proliferation of BMSCs of the aged rats. Key words: Sodium selenite, Aging, Mesenchymal stromal cells, Telomere, Telomerase