بررسي ملكولي ژنهاي حدت stx1,stx2‌‌در باكتري اشريشياكلي جداشده از نمونه‌ هاي اسهال و تعيين مقاومت آنتي‌بيوتيكي آنها

Molecular analysis of virulence genes stx1, stx2 in Escherichia coli isolated from stool samples and determining of their antibiotic resistance

زمينه و هدف: پاتوتايپهاي مختلف اشريشياكلي، از جمله EHEC (Enterohemorragic Escherichia coli) عامل ايجاد بيماريهاي روده اي و خارج روده اي مي باشند. اشريشياكلي شيگا توكسين (STEC)، به همراه سويه هايEHEC به عنوان شايع ترين عامل ايجاد كننده اسهال در كشورهاي توسعه يافته شناخته مي شوند. هدف از اين مطالعه، بررسي ژنهاي حدت در باكتري اشريشياكلي به روشMultiplex PCR جداشده از نمونه هاي اسهال و تعيين ميزان مقاومت آنتي بيوتيكي اين نمونه ها مي باشد. مواد و روش كار: در اين مطالعه توصيفي ndash; مقطعي، پس از جمع آوري 100 نمونه اسهال انساني از مراكز درماني سرپايي شهر تهران، آزمايش هاي كشت ميكروبي و بيوشيميايي انجام و 55 سويه باكتري اشريشياكلي جداسازي و همزمان DNA جدايه ها استخراج گرديد. آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي به روش ديسك ديفيوژن و E-test بر اساس دستورالعمل CLSI با آنتي بيوتيك هايي از گروه هاي مختلف انجام شد. داده هاي آماري با SPSS19 و با استفاده از آزمون هاي آماري توصيفي مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته ها: اكثر اشريشياكلي جدا شده نسبت به آنتي بيوتيكهاي اريترومايسين (100%) و آمپي سيلين (94%) مقاوم و نسبت به نيتروفورانتوئين (96%) و آميكاسين (100%) حساس بودند. در آزمون ETest بيشترين مقاومت نسبت به آنتي بيوتيك اريترومايسين (100%) و بيشترين حساسيت به آنتي بيوتيكهاي جنتامايسين و آميكاسين (100%) مشاهده شد. بر طبق نتايج آزمون ملكولي از مجموع 55 نمونه انساني، 12 نمونه (8/21%) واجد ژنStx2 و 4 نمونه (2/7%) حاوي ژن Stx1 هستند. نتيجه گيري: نتايج بدست آمده در اين مطالعه در مقايسه با ساير مطالعات نشان داد كه سن افراد، نوع نمونه، محل جغرافيايي، نوع رژيم غذايي، وضعيت بهداشت فردي، فصول سال، در روش هاي شناسايي و جداسازي باكتري نقش دارند.

Background and Objectives: Pathotypes of Escherichia coli, including EHEC (Enterohemorragic Escherichia coli) are an important cause of enteric disease and extraintestinal. Shiga toxin E.coli (STEC), along with EHEC strains are known as the most common cause of diarrhea in developing countries. The purpose of this study was to evaluate the virulence genes in E.coli strain by MultiplexPCR method isolated from diarrhea and determine antibiotic resistance. Materials and Methods: In this crosssectional study, after collecting 100 samples of human diarrhea of outpatient treatment centers in Tehran, culture and biochemical tests and 55 strains of Escherichia coli strains isolated and at the same time was extracted DNA. Antimicrobial susceptibility testing was performed by disk diffusion and Etest method based on CLSI guidelines with antibiotics from various groups. Statistical data were analyzed with SPSS version 19, using descriptive statistics. Results: Most E.coli isolates resistant to antibiotics Erythromycin (100%) and Ampicillin (94%) and were sensitive to Nitrofurantoin (96%) Amikacin (100%). The test ETest greatest Resistance to antibiotics erythromycin (100%) and the most sensitivity was observed to antibiotics Gentamycin and Amikacin (100%). According to the results of molecular analysis of 55 human samples, was identified in 12 samples (21/8%) Stx2 gene and 4 sample (7/2%) Stx1 gene. Conclusion: The results obtained in this study compared to other studies showed that involved age, sample type, geographic location, type of diet, personal hygiene, seasons, identification and isolation procedures. Keywords: Escherichia coli, STEC, virulence genes