جداسازي و شناسايي باكتري‏هاي تجزيه كننده نفت خام از شكم‏پا Haustrum scobina‏‏ جمع‏آوري شده از خليج فارس (ناحيه ساحلي بندرعباس)

Isolation and identification of crude oil degrading bacteria from gastropod Haustrum scobina collected from Persian Gulf (Bandar Abbas Shoreline provenance)

مقدمه: تجزيه زيستي يك جايگزين خوب نسبت به روش هاي شيميايي و فيزيكي براي پاك سازي مناطق آلوده به نفت است. عوامل متعددي بر تجزيه زيستي شامل: غلظت نفت خام، توليد بيوسورفكتانت، شوري و زمان انكوباسيون تاثير مي گذارند. هدف از پژوهش حاضر، شناسايي و جداسازي باكتري هاي تجزيه كننده نفت از شكم پا و بررسي اثر توليد بيوسورفكتانت، غلظت هاي مختلف نفت، زمان انكوباسيون، كشت مخلوط و شوري بر تجزيه نفت توسط باكتري هاي تجزيه كننده است. مواد و روش ها: در اين پژوهش، از آب و شكم پايان خليج فارس نمونه برداري شد. براي جداسازي باكتري هاي تجزيه كننده نفت خام از نمونه هاي جمع آوري شده، محيط كشت ONR7a استفاده شد. سويه هايي كه رشد و حذف نفت بالاتري داشتند انتخاب و شناسايي شدند. توليد بيوسورفكتانت، اثر غلظت هاي مختلف نفت، زمان انكوباسيون، كشت مخلوط و شوري بر ميزان تجزيه زيستي بررسي شد. نتايج: در مجموع 6 كلوني كه قادر به تجزيه نفت خام بودند، جداسازي شد. 2 سويه بر اساس حذف نفت بيشتر و فعاليت امولسيون كنندگي بيشتر انتخاب شد. اين سويه ها به جنس هاي Vibrio و Halomonas تعلق داشتند. فعاليت امولسيون كنندگي و ميزان تجزيه نفت براي سويه Vibrio alginolyticus به ترتيب 4/58 و 58/67 درصد و براي سويه Halomonas ps به ترتيب 6/11و 44/51 درصد بود. بنابراين، مي توان نتيجه گرفت سويه هايي كه داراي فعاليت امولسيون كنندگي بيشتري مي باشند، بيوسورفكتانت بيشتري توليد كرده و قابليت حذف نفت بالاتري دارند. ميزان رشد و تجزيه نفت با طولاني شدن دوره انكوباسيون، افزايش يافته است. همچنين، مشاهده شد كشت مخلوط سويه هاي Vibrio و Halomonas ميزان بالاتري از تجزيه را نسبت به كشت آن ها به تنهايي دارد و با افزايش غلظت نفت از 5/2 درصد به بعد ميزان رشد باكتري و تجزيه نفت كاسته شده است. بهينه رشد اين سويه در 20 تا80 گرم در ليتر سديم كلريد است و در غلظت هاي بالاتر نمك، ميزان رشد كاهش يافته است. بحث و نتيجه گيري: بررسي هاي انجام شده نشان داد كه باكتري هاي موجود در خليج فارس از تنوع زياد با توان تجزيه نفت بالا برخوردار هستند و مي توان از آن ها براي پاك سازي مناطق دريايي آلوده به نفت استفاده كرد.

Introduction: Biodegradation is a good alternative rather than chemical and physical methods for cleaning oil contaminated areas. Several factors like crude oil concentration, biosurfactant production, salinity and incubation time affect the biodegradation. Materials and methods: In this study, seawater sample and gastropod were collected from Persian Gulf. To isolate oil degrading bacteria from collected samples, ONR7a medium was used. The strains that had more growth and higher oil removal were selected and identified. The factors such as the effect of different concentrations of oil, incubation time, mixed cultures and salinity on the biodegradation were investigated. Results: Six crude oil degrading bacteria were isolated. Between these bacteria 2 strains were selected based on higher oil removal. These strains belonged to the genus Vibrio and Halomonas. Strains with higher Emulsification activity produce more biosurfactant and have higher oil biodegradation. Growth and oil degradation have increment pattern by prolonging the incubation time. Mixed culture of Vibrio and Halomonas strains have higher rates of degradation rather than culturing with one of them. Increase in crudeoil concentration to 2.5% caused reduction in growth of bacteria and degradation of oil. Discussion and conclusion: The results of this study show that crude oil degrading bacteria have high diversity in Persian Gulf. These bacteria have higher capability for oil degradation thus they can be used for remediation of oil contaminated areas.