بررسي اثر ضد ميكروبي و ضد اتصالي لاكتوباسيلوس‏هاي ‏پروبيوتيكي بر باكتري اشريشياكلي يوروپاتوژنيك ‏‏(UPEC)

The study of Antimicrobial and Anti-adhesive effect of ProbioticLactobacilli on Uropathogenic Escherichia coli (UPEC)

مقدمه: يكي از عوامل مهم در عفونت هاي دستگاه ادراري ناشي از اشريشياكلاي يوروپاتوژنيك، چسبيدن باكتري به سطح سلول ميزبان است. بنابراين، مهار اتصال باكتري، راهكاري مناسب براي مهار و پيشگيري از عفونت است . هدف از پژوهش حاضر، بررسي خواص ضد ميكروبي و به ويژه ضد اتصالي پروبيوتيك ها بر روي پاتوژن شايع دستگاه ادراي ( اشريشياكلي)، با استفاده از روش هاي ميكروبي است.مواد و روش ها: در پژوهش حاضر از دو سويه لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس PTCC 1643 و لاكتوباسيلوس كازه اي PTCC 1608 استفاده شد. تعداد 40 باكتري اشريشياكلي يوروپاتوژنيك از بيمارستان هاي استان سمنان جمع آوري شد. 20 نمونه با بيش ترين توانايي در توليد بيوفيلم، براي انجام آزمون هاي ميكروبي انتخاب شدند. به منظور بررسي آثار ضد ميكروبي لاكتوباسيلوس ها در حالت كشت كامل و مايع رويي كشت ( سوپرناتانت)، به ترتيب از روش هاي كشت دولايه اصلاح شده و رقت سازي سوپرناتانت استفاده شد. مكانيسم تجمع پذيري لاكتوباسيلوس ها با پاتوژن مورد نظر بررسي شد. تشخيص فعاليت ضد اتصالي سوپرناتانت لاكتوباسيلوس ها، با استفاده از روش ميكروتيترپليت 96 خانه اي انجام شد.نتايج: در تمامي آزمون هاي ميكروبي به كار رفته اثر ضد ميكروبي و اثر ضد اتصالي لاكتوباسيلوس ها بر باكتري هاي اشريشياكلي يوروپاتوژنيك تاييد شد. لاكتوباسيلوس كازه اي با اثر مهاري رشد ( 7/42 ميلي متر) و ضد اتصالي ( 7/46 درصد) به عنوان باكتري ﭘروبيوتيك مناسب تر در اين پژوهش گزارش شد. بحث و نتيجه گيري: با توجه به نتايج به دست آمده لاكتوباسيلوس هاي پروبيوتيكي در جلوگيري از اتصال، تشكيل بيوفيلم و بيماري زايي باكتري اشرشياكلي يوروپاتوژنيك داراي آثار چشمگيري هستند. بنابراين، استفاده از آن ها براي پيشگيري و درمان عفونت دستگاه ادراي به عنوان راهكاري مهم و عملي، منطقي و قابل قبول است.

Introduction: One of the most important factors in Urinary Tract Infection caused by Uropathogenic Escherichia coli, is the attachment of bacteria to the host cell surface. Thus, inhibition of bacterial attachment is the appropriate action to prevent infection. The aim of this study was to investigate the antimicrobial and especially anti adhesive characteristics of probiotic bacteria against Escherichia coli by using microbial techniques. Materials and methods: In this study two strains of Lactobacillus acidophilus PTCC 1643 and Lactobacillus casei PTCC 1608 were used .40 Uropathogenic Escherichia coli were collected from Semnan province hospitals.20 samples with the more capability of biofilm production were selected for microbial tests. To evaluate the antimicrobial activity of complete culture and supernatant of probiotic lactobacilli, modified double layer method and dilution of supernatant were used, respectively. The mechanism of co aggregation of lactobacilli with pathogens was examined. The microtitre plate method was used to detect antiadhesive activity of Lactobacilli supernatant. Results: The antimicrobial and antiadhesive effects of probiotic lactobacilli on Uropathogenic Escherichia coli were confirmed in all tests. In this study, Lactobacillus casie with the growth inhibitory (42/7 mm) and antiadhesive (46/7mm) effects were reported as a proper probiotic bacterium. Discussion and conclusion: According to the results, the probiotic lactobacilli have spectacular effects to prevent attachment, biofilm formation and pathogenicity of UPEC, so using them to prevent and treat Urinary tract infection is a practical, reasonable and acceptable method.