اعتبارسنجي روشي سريع و ساده براي تعيين فعاليت آنزيم پروتياز با روش انتشار

The validity of simple and rapid method for detection of protease activity by diffusion

در بررسي برخي محلول‌هاي بيولوژيكي گاهي لازم است تا فعاليت آنزيم پروتياز در آن محلول تعيين شود. بيشتر روش‌هايي كه تاكنون پيشنهاد شده‌اند بر مبناي تجزيه يك نوع پروتيين و تعيين فرآورده نهايي تجزيه كه اسيد آمينه مي‌باشد، استوار است. در اين پژوهش اعتبارسنجي يك روش ساده و به نسبت سريع براي تعيين فعاليت پروتياز محلول‌هاي مورد نظر بررسي شده است. در اين روش اساس كار بر مبناي تجزيه پروتيين موجود در شير با آنزيم موجود در ماده مورد نظر است. با هيدروليز پروتيين شير در مدياي تحت آزمون، محيط مديا كدورت خود را از دست داده و رنگ مديا به‌صورت شفاف درمي‌آيد و بسته به فعاليت آنزيمي پروتياز، آنزيم در محيط انتشار يافته و براساس درجه انتشار آنزيم مي‌توان به فعاليت آنزيمي آن محلول پي‌برد. بر طبق روشي كه شرح مختصر آن داده شد، فعاليت آنزيم پروتياز در عصاره ميوه كيوي به‌عنوان منبع گياهي حاوي فعاليت پروتيازي و چندين محلول بيولوژيكي شامل مايع شكمبه بره بالغ، ميش و گاو شيري نيز تعيين شدند. هرچند اين روش يك روش كيفي است اما با استفاده از شاخصي كه در متن توضيح داده شده است مشخص شد كه اين شاخص، همبستگي مثبت (926/0 = r) و معني‌داري (008/0 = P) با فعاليت پروتيولايتيكي به دست آمده از روش مرسوم دارد كه استفاده آن را در شرايطي كه به دقت زياد نياز نيست، قابل توصيه مي‌كند.