شناسايي ژن‌هاي CTX-M، bla SHV و TEMدر سويه‌هاي پسودوموناس آئروژينوزاي جداشده از نمونه‌هاي انساني و دامي‌ به روش Multiplex-PCR

Identification of blaCTX-M, blaSHV, and blaTEM Genes in Pseudomonas Aeruginosa Strains Isolated from Human and Animal Samples Using Multiplex-PCR Method

زمینه و هدف: پسودوموناس آئروژینوزا، یكی از عوامل مهم در ایجاد عفونت‌های فرصت‌طلب می‌باشد. عفونت ایجادشده به‌وسیله پسودوموناس آئروژینوزا، اغلب شدید و تهدیدكننده بوده و درمان آن به دلیل حساسیت محدود به عوامل آنتی‌بیوتیكی و كسب مقاومت در حین درمان، مشكل است. مطالعه حاضر با هدف شناسایی ژن‌های CTX-M، bla SHV و  TEMدر سویه‌های پسودوموناس آئروژینوزای جداشده از نمونه‌های انسانی و دامی ‌به روش Multiplex-PCR انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی – مقطعی، در مجموع تعداد 120 جدایه پسودوموناس آئروژینوزا از نمونه‌های انسانی و شیرخام حیوانات به دست آمد. تست حساسیت آنتی‌بیوتیكی طبق دستورالعمل CLSI و براساس روش انتشار در ژل تعیین گردید. DNA سلولی با استفاده از كیت DNA-سیناژن (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF)، استخراج و PCR چندگانه به‌منظور شناسایی ژن‌های CTX-M، SHV و TEM انجام شد. یافته‌ها: در این مطالعه، بیشترین میزان مقاومت در بین نمونه‌های انسانی و دامی‌ برای آموكسی‌سیلین، آمیكاسین (100%) و كمترین میزان مقاومت نسبت به سیپروفلوكساسین با فراوانی 90% در بین نمونه‌های انسانی و 4/93% در بین نمونه‌های دامی ‌مشاهده گردید. تست حساسیت آنتی‌بیوتیكی طبق دستورالعمل CLSI و براساس روش انتشار در ژل تعیین شد. طبق نتایج CDT، 73 (8/60%) ایزوله‌، فنوتیپ ESBLs را از خود نشان دادند و براساس نتایج M-PCR؛ 26 (6/21%) و 41 (2/34%) سویه، حاوی ژن CTX-M و TEM بودند. نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان داد سویه‌های پسودوموناس آئروژینوزا، مقاومت بالایی دارند. همچنین فراوانی این ژن‌ها در بین ایزوله‌های دامی ‌و انسانی بالا می‌باشد، در نتیجه كنترل این باكتری‌ها هم در انسان و هم دام، از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است.

Background and Objectives: Pseudomonas aeruginosa is one of the most important causes of opportunistic infections. The infection caused by P. aeruginosa is commonly severe and life-threatening and hard to treat due to limited susceptibility to antibiotics and development of resistance during treatment. The aim of the present study was to identify blaCTX-M, blaSHV, and blaTEM genes in P. ‎aeruginosa strains isolated from human and animal samples using Multiplex-PCR method.‎ Methods: In this descriptive cross-sectional study, a total of 120 isolates of P. aeruginosa were obtained from of human samples and animal raw milk. Antibiotic susceptibility test was determined by gel diffusion method and according to CLSI guidelines. Cellular DNA was extracted by CinnaPure-DNA (Cell culture, Tissues, Gram-negative Bacteria and CSF) and Multiplex-PCR was performed for identification of blaCTX-M, blaSHV, and blaTEM genes. Results: In this study, the highest resistance in human and animal samples, was seen to amoxicillin and amikacin (100%) ‎and the lowest resistance was to ciprofloxacin with frequency of 90% in human ‎samples and 93.4% in animal samples. Based on the CDT results, 37(60.8%) isolates showed ESBLs phenotype, and based on the M-PCR results, 26 ‎‎(21.6%) and 41 (34.2%) strains had blaCTX-M and blaTEM genes, respectively. Conclusion: The results of this study indicated that P. aeruginosa strains have high levels of resistance. Also, the frequency of these genes is high among human and animal isolates, therefore controlling these bacteria in humans and animals is of particular importance.