توزيع ژن هاي كدكننده پنج آنتي ژن پروتئيني در ايزوله هاي استرپتوكوكوس پنومونيه جدا شده از كودكان سالم اردبيل, ايران

Distribution of Gens for Five Protein Antigens among Streptococcus Pneumoniae Isolates Recovered from Healthy Children in Ardabil, Iran

زمينه و هدف: استرپتوكوكوس پنومونيه به عنوان يكي از عوامل مهم مرگ و مير قابل پيشگيري توسط واكسن در سراسر دنيا است. واكسن هاي رايج پنوموكوك از آنتي ژن هاي كپسولي باكتري تشكيل شده اند. اين واكسن ها وابسته به سروتيپ هستند و حفاظت كامل در برابر عفونت هاي پنوموكوكي را به وجود نمي آورند. به دليل چنين مشكلاتي نسل جديد واكسن ها بر پايه پروتئين هاي پنوموكوكي در حال توسعه هستند. هدف اين مطالعه تعيين توزيع ژن هاي كدكننده پنج آنتي ژن پروتئيني استروپتوكوكوس پنومونيه شامل پروتئين سطحي پنوموكوكي C (pspC)[1] هيستيدين ترياد پنوموكوكي D و E (phtD, phtE) 2، پروتئين A تنظيم شونده توسط rlr (rrgA) 3 و اتوليزين (lytA)4 در ميان ايزوله هاي پنوموكوكي جدا شده از نمونه هاي نازوفارنژيال كودكان سالم بود. روش كار: در مجموع 43 ايزوله استرپتوكوكوس پنومونيه از نمونه هاي نازوفارنژيال كودكان سالمي كه در سال 1392 به مهدكودك هاي شهرستان اردبيل مراجعه كرده بودند، جدا شد. ايزوله ها در ابتدا توسط آزمايشات فنوتيپي مانند حساسيت به اپتوچين و حلاليت در صفرا شناسايي شدند. سپس توسط رديابي ژن كد كننده آنتي ژن كپسولي (cpsA) تاييد شدند. براي رديابي ژن هاي pspC، phtD، phtE، rrgA و lytA از روش PCR استفاده شد. يافته ها: در 84.4 درصد ايزوله ها حداقل يكي از ژن هاي مورد مطالعه رديابي شد. ژن هاي lytA، pspC، phtE، phtD و rrgA به ترتيب در 70، 60، 39.5، 35 و 25.5 درصد ايزوله ها شناسايي شدند. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه ژن هاي مورد مطالعه به طور يكنواخت در ميان ايزوله ها وجود ندارند و براي بدست آوردن يك واكسن پنوموكوكي با پوشش حفاظتي كامل بايستي از مجموعه اي از اين آنتي ژن ها استفاده شود.

Background & objectives: Streptococcus pneumoniae is  one of the major causes of vaccine preventable diseases worldwide. Current pneumococcal vaccines consist of serotype specific capsular polysaccharide antigen and do not offer full clinical protection against pneumococcal diseases. Due to such limitations, a new generation of proteinbased pneumococcal vaccines is being developed. The objective of this study was to determine the distribution of gens encoding five protein antigens including pneumococcal histidine triad D and E (phtD, phtE), rlr regulated gene A (rrgA), Autolysin (lytA) and Pneumococcal surface protein C (pcpC) among pneumococcal isolates collected from nasopharyngeal specimens in healthy children. Methods: A total of 43 pneumococcal isolates were collected from nasopharyngeal specimens of healthy children attending the kindergartens in Ardabil province. The strains were identified using optochin susceptibility and bile solubility testes and further confirmed by amplification of capsular polysaccharide A gene (cpsA). PCR was used for screening the presence of pcpC, phtD, phtE, rrgA and lytA genes. Results: 81.4 % of isolates were found to contain at least one of the tested genes. lytA, pcpC, phtE, phtD and rrgA were detected in 70, 60, 39.5, 35 and 25.5 percent of isolates, respectively. The results showed that the genes were not distributed consistently among the isolates and for obtaining a full coverage pneumococcal vaccine, multiple choices of these antigens should be included.