اثر ضد سرطاني سيليبينين بر روي رده سلولي سرطان اپيتليالي تخمدان و بررسي بيان ژن P21

AntiCancer Effect of Silibinin on Epithelial Ovarian Cancer Cell Line and P21 Gene Expression

زمينه و هدف: سرطان تخمدان يكي از كشنده ترين سرطانهاي زنان مي باشد و نوع اپيتليالي آن، شايع ترين فرم تومورهاي بدخيم تخمدان را شامل مي شود. از جمله درمانهاي مرسوم، استفاده از شيمي درماني ميباشد، اما با استفاده متداول از اين روش درماني، عوارض جانبي و مقاومت دارويي نيز مشاهده ميشود كه موجب عدم پاسخ مناسب به درمان ميباشد. سيليبينين ماده موثره گياه خار مريم (Milk thistle)، تركيب گياهي است كه از ديرباز به دليل آثار مفيد آن بر روي اندامهاي مختلف انسان مورد استفاده قرار ميگرفت و اخيراً نيز اثر ضدسرطاني آن به اثبات رسيده است. هدف از اين مطالعه بررسي اثر سيليبينين 48 ساعت پس از تيمار بر روي رده سلولي SKOV3 سرطان تخمدان و بررسي بيان ژن p21، كه دخيل در پيشرفت چرخه سلولي ميباشد. روش كار: رده سلولي SKOV3 سرطان اپيتليالي تخمدان انساني، بصورت تك لايه داخل فلاسكهاي 25 cm2 در محيط RPMI1640 به همراه 10% سرم جنين گاوي (FBS) كشت داده شدند، سلولهاي زنده به وسيله هموسايتومتر شمارش شده، داخل پليتهاي 96 خانه ريخته شده و توسط غلظتهاي مختلف سيليبينين تيمار شدند. روش MTT به منظور يافتن درصد زنده بودن سلولها انجام يافت. به منظور بررسي بيان ژن P21، RNA آنها استخراج و cDNA سنتز شده، نهايتاً realtime PCR انجام يافت. يافتهها: رشد سلولها پس از 48 ساعت تيمار با سيليبينين در مقايسه با گروه كنترل بدون تيمار با دارو به طور قابل توجهي مهار شدند، همچنين افزايش بيان در ژن P21 مشاهده شد. نتيجه گيري: با توجه به نتايج بدست آمده، سيليبينين به عنوان يك داروي مؤثر گياهي در درمان سرطان مطرح ميباشد و بررسي بر روي مدل حيواني پيشنهاد ميشود.

Background & objectives: Epithelial ovarian carcinoma seems to be one of the most lethal cancer types among all gynecological malignancies. The conventional course of therapy includes chemotherapy. Actually most cancers respond to chemotherapy but in the long run drug resistance and side effects cause treatment failure. In addition, milk thistle (silibinin), a plant that has been used from ancient time because of its good effects on different organs, determined to have powerful antioxidant activity.  The aim of this study was to examine the effect of silibinin on SKOV3 cancer cell line after 48 hours of treatment and P21 gene expression which involves in cell cycle progression. Methods: The human epithelial ovarian cancer cell line SKOV3 was cultured as monolayer in 25 cm2 flask in RPMI1640 medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS). Then the numbers of live cells were calculated using hemocytometer method and the cells were seeded in 96well flatbottomed culture plates and treated with different concentration of Silibinin. MTT assay was carried out to determine cell viability. To study P21 gene expression, RNA extraction and cDNA synthesis were carried out and realtime PCR was done. Results: Cell growth was inhibited considerably by Silibinin treated groups compared with control after 48 hours. P21 gene expression was increased as well. Conclusions: According to the results, Silibinin can be used as an effective drug in cancer treatment. More studies on animal models are also suggested.