شناسايي بتالاكتاماز نوع AmpC در جدايه هاي باليني اشريشياكلي در شهر كرمانشاه

Detection of AmpC beta-lactamase genes in clinical isolates of Escherichia coli in Kermanshah city

سابقه و هدف: بتالاكتامازهاي نوع AmpC، آنتي بيوتيك هايي مانند پني سيلين ها، سفالوسپورين ها و سفامايسين ها را هيدروليز مي كنند و به مهاركننده هايي مثل كلاوولانيك اسيد، سولباكتام و تازوباكتام مقاومت نشان مي دهند. در اين مطالعه به بررسي شيوع آنزيم AmpC بتالاكتاماز توليد شده توسط جدايه هاي باكتري اشريشياكلي از بيمارستان هاي كرمانشاه پرداخته شد. مواد و روش ها: تعداد 100 ايزوله باليني اشريشياكلي از بيمارستانهاي شهر كرمانشاه جمع آوري شد و پس از تعيين هويت، از نظر توليد بتالاكتاماز نوع AmpC با استفاده از روش انتشار از ديسك مورد بررسي قرار گرفتند. جدايه هايي كه از نظر فنوتيپي به صورت بلقوه واجد اين بتالاكتاماز بودند به روش Multiplex PCR مورد بررسي قرار گرفتند. همچنين مقاومت آنها به آنتي بيوتيك هاي سيپروفلوكساسين، آميكاسين، مروپنم و آزترونام به روش ميكرو دايلوشن براي تعيين MIC (Minimal inhibitor concentration) سنجيده شد. يافته ها: در اين مطالعه 44% از جدايه هاي باليني از نظر فنوتيپي مولد بتالاكتاماز نوع AmpC بودند. پس از بررسي بيشتر اين 44 ايزوله با روش Multiplex PCR مشخص گرديد 1/44% از آنها داراي ژن AmpC بتالاكتاماز بودند. نتيجه گيري: شيوع AmpC بتالاكتامازها به دليل بي تاثير نمودن تجويز سفالوسپورين هاي نسل سوم به يك چالش مهم در درمان بيماران تبديل شده است. انجام آزمايشات فنوتيپي و روش هاي مولكولي تشخيص بتالاكتاماز ها مانند PCR مي تواند بسيار مفيد فايده باشد. اين مطالعه حاكي از شيوع بالاي AmpC بتالاكتاماز در شهر كرمانشاه است كه دليل احتمالي آن مصرف خودسرانه آنتي بيوتيك ها و يا عدم انجام آنتي بيوگرام قبل از آغاز درمان است. عدم آگاهي از روش هاي تاييدي توليدESBL و مولكولي مي تواند به گسترش مقاومت ناشي از AmpC بتالاكتاماز دامن بزند.

Aims and Background: AmpC B-lactamases hydrolyze penicillins, cephalosporins and cephamycins and resist inhibition by clavulanate, sulbactam and tazobactam. In this study, has been paid to prevalence of AmpC beta-lactamase enzymes produced by Escherichia coli isolates from various hospitals of Kermanshah city. Material and Methods: A total of 100 clinical isolates of Escherichia coli were collected from the city of Kermanshah and after identification screened by Disk diffusion agar method and combined disk for production AmpC beta-lactamase. The isolates that were phenotypic have features these enzymes tested by Multiplex PCR. Also resistance of ESBLs producing isolates to ciprofloxacin, amikacin, meropenem and azteronam was measured by Microdilution broth for determination MIC (Minimal inhibitor concentration). Results: In this study, 43% of clinical isolates were Ampc beta-lactamase producers, based on phenotypic. After most review by Multiplex PCR showed 44.1% of them has Ampc beta-lactamase gene. Conclusion: Prevalence of AmpC beta-lactamase due to ineffective prescription of the third of generation cephalosporins has become a major challenge for the treatment of disease. Phenotypic tests and Molecular methods such as PCR the detection of beta-lactamases enzymes can be very useful. Although this study has shown a high prevalence of AmpC beta-lactamase the city of Kermanshah, which is major cause of the self use of antibiotics or lack of antibiogram before beginning treatment. Lack of knowledge about phenotypic and molecular methods can provoke the development of resistance of AmpC beta-lactamase.