تأثير عصاره هيدروالكلي گياه علف چاي بر مهاجرت سلولي و توليد واسطه‌هاي التهابي در پريتونئيت حاد القاء شده با زيموزان در موش سفيد آزمايشكاهي

The effects of hydro- alcoholic extract of Hypericum perforatum on cell migration and inflammatory mediators production in acute peritonitis induced by Zymosan in NMRI mice

زمینه و هدف: پریتونیت القاء شده با زیموزان به‌منظور مطالعه فراخوانی مونوسیت‌ها و نوتروفیل‌ها به حفره صفاقی و هم‌چنین ارزیابی اثرات ضدالتهابی داروهای جدید و یا موجود به كار می­رود. این مطالعه به ‌منظور ارزیابی اثرات عصاره هیدرو الكلی گیاه علف چای بر پریتونیت حاد القاء شده با زیموزان در موش­های سوری انجام ‌شده است. روش بررسی: در این مطالعه تجربی 50 سر موش سوری نر به ‌طور تصادفی در5 گروه به ترتیب با دارونما(فسفات سالین نرمال)، 100، 200و 400 میلی‌گرم بر كیلو گرم عصاره­ی هیدرو الكلی گیاه علف چای و دوز 10 میلی‌گرم بر كیلو گرم از داروی دیكلوفناك، یك ساعت قبل از القاء پریتونیت درمان شدند. به‌منظور القاء پریتونیت  به هر موش200 میكرو لیتر از محلول زیموزان با غلظت 40 میكروگرم بر میلی‌لیتر به‌ صورت داخل صفاقی تزریق شد. بعد از 48 ساعت محوطه صفاقی با 5 میلی‌لیتر PBS سرد شسته شده و سلول­های جداشده به‌ منظور ارزیابی شمارش تفریقی سلول‌ها، تولید نیتریك اكسید و شدت انفجار تنفسی مورد استفاده قرار گرفتند. داده‌های آماری با استفاده از آزمون‌های آماری تست  كروسیكال والیس، مان ویتی و تعدیل بونفرونی تجزیه و تحلیل شدند. یافته‌ها:  بر اساس یافته‌های به ‌دست ‌آمده ، تولید نیتریك اكسید و میزان انفجار تنفسی در سلول‌های اگزودای استحصالی از لاواژ صفاق در موش‌هایی كه عصاره علف چایی را در دوزهای 200 و 400 میلی‌گرم بر كیلوگرم یا دیكلوفناك (10 میلی‌گرم بر كیلو گرم)را دریافت كرده بودند، نسبت به موش‌های شاهد (مبتلا به پریتونئیت و دریافت‌كننده فسفات سالین بافر )كاهش یافت. تعداد كلی سلول‌ها در محوطه صفاقی در همه گروه­های درمانی كاهش یافت. با این ‌حال  نسبت تفریقی سلول‌ها، اختلاف معنی‌داری را در بین گروه­های درمانی  با عصاره هیدروالكلی گیاه علف چای را نشان نداد.  استفاده از دیكلوفناك و عصاره گیاهی منجر به كاهش سطح سایتوكاین­های التهابی TNF-α، IL-1 و IL-6 شد. در زمینه كاهش سطح تولید TNF-α و IL-1، دیكلوفناك قوی‌تر از دوزهای مختلف عصاره عمل كرده است. با این ‌حال موش‌های مبتلا به پریتونئیت و دریافت كننده عصاره هیدروالكلی به ‌خصوص در دوز 400 میلی‌گرم بر كیلو گرم كاهش بیشتری در سطح IL-6  نسبت به موش‌های مبتلا به پرتونئین و دریافت كننده دیكلوفناك نشان دادند. نتیجه‌گیری:  درمجموع به نظر می‌رسد كه  عصاره هیدروالكلی گیاه علف چای می­تواند به‌عنوان یك منبع طبیعی برای كنترل التهاب ناشی از پریتونیت حاد به كار رود.

Background and aim: Zymosan-induced peritonitis model can use to study the recruitment of monocytes and neutrophils into the peritoneal cavity and to study the effects of existing and novel anti-inflammatory drugs. This study was conducted to evaluate the effects of hydroalcoholic extract of Hypericum Perforatum on acute peritonitis induced by Zymosan in NMRI mice. Methods: Fifty male NMRI mice were randomly allocated in 10 equal gropes and treated with 0 ,100, 200 or 400 mg/kg of hydroalcoholic extract of H. Perforatum and or 10mg/kg diclofenac 1 hours before the induction of peritonitis. To induce peritonitis, each mouse intraperitoneally received 10 µg of zymosan in 0.4 ml of saline. After 48 h, the peritoneal cavity was lavaged by 5 ml of cold PBS and the isolated cells were used  to evaluate cell differential count, nitric oxide production and severity of respiratory burst. Statistical dada tests were analyzed using the Kruskal-Wallis test, Mann-Whitney and Bonferroni adjustment. Results: The data showed that the nitric oxide and respiratory burst which was produced from exudate cells by  peritoneal lavage in mice that received H. Perforatum at  doses of 200 and 400 mg/kg or diclofenac compared to mice received normal saline were reduced. Total cell number in peritoneal cavity significantly decreased in all treatment group. However, no significant difference was observed between treatment groups with Hypericum perforatum extract. Using diclofenac or hydroalcoholic extract of H. Perforatum caused a significant decrease in the levels of TNF-α, IL-1 and IL-6. Diclofenac caused more profound reduction in the levels of TNF-α, IL-1 compared to extract. Nevertheless, the level of IL-6 was indicated a significant decrease in mice with peritonitis received hydroalcoholic extract especially in dose 400 mg/kg compared to mice with peritonitis received diclofenac. Conclusion: In total it seems that the hydroalcholic extract of H. Perforatum may be a suitable as natural source to control inflammation caused by acute peritonitis.