فعاليت ضد ويروسي و ويروسيدالي عصاره گياه ماميران(Chelidonium majus L.) در مقايسه با آسيكلووير عليه ويروس هرپس سيمپلكس تيپ يك

Antiviral and virucidal activity of Chelidonium majus L. extract compared with Acyclovir against Herpes simplex virus type 1

زمینه و اهداف: ویروس هرپس سیمپلكس یكی از مهم‌ترین ویروس‌های بیماری زای انسانی است كه قادر به ایجاد تبخال‌های دهانی، كراتوكونژنكتیویت و آنسفالیت می‌باشد. آسیكلوویر در درمان عفونت‌های این ویروس كاربرد دارد، امروزه به دلیل ایجاد مقاومت دارویی، نیاز به انجام تحقیق‌ در زمینه یافتن داروهای جدید به خصوص داروهای گیاهی افزایش یافته است. این پژوهش با هدف بررسی اثر ضد ویروسی عصاره متانولی گیاه مامیران در مقایسه با آسیكلوویر علیه ویروس فوق در كشت سلولی هلا انجام شده است. روش بررسی: در پژوهش تجربی حاضر سمیت عصاره متانولی مامیران و آسیكلوویر بر روی سلول هلا با دو روش MTT و تریپان‌بلو تعیین شد. اثر ضد ویروسی عصاره مامیران در غلظت‌های مختلف به ترتیب؛ 1800، 1700، 1600، 1500 و 1400 میكروگرم بر میلی‌لیتر و آسیكلوویر در غلظت‌های 500،100، 75، 50، 30 و 10 میكروگرم بر میلی‌لیتر بررسی شد. هم‌چنین اثرات ضد ویروسی آنها در زمان‌های مختلف قبل، بعد و هم زمان با جذب ویروس بررسی شد. در هر مرحله، ویروس با روش 50 درصد دوز عفونی كننده كشت سلول(TCID50) تعیین تیتر گردید. جهت مقایسه اثرات دو تركیب بر ویروس از آزمون آماری تی تست استفاده شد. یافته‌ها: بالاترین غلظت غیر سمی ‌عصاره مامیران بر سلول هلا غلظت 1600 میكروگرم بر میلی‌لیتر تعیین گردید كه بیشترین اثر مهاركنندگی بر تكثیر ویروس هرپس سیمپلكس تیپ یك را داشت. آسیكلوویر سمیت پایینی روی سلول هلا نشان داد. غلظت 30 میكروگرم بر میلی‌لیتر از آن به عنوان رقت مورد استفاده در مراحل بعدی كار در نظر گرفته شد. بیشترین اثر بازدارندگی عصاره یك ساعت پس از جذب مشاهده شد و آسیكلوویر بلافاصله بعد از جذب تا 8 ساعت پس از آلودگی، تكثیر ویروس را به طور كامل مهار كرد. نتیجه‌گیری: عصاره متانولی مامیران در مقایسه با آسیكلوویر در ساعات اولیه پس از آلودگی اثر كمتری بر مهار تكثیر ویروس هرپس سیمپلكس دارد. با توجه به افزایش ایجاد سویه های مقاوم به آسیكلوویر و هم‌چنین وجود عوارض جانبی زیاد این دارو، تحقیق‌های بیشتری جهت دستیابی به تركیب‌های مؤثر با فعالیت ضد ویروسی موجود در عصاره فوق لازم می‌باشد.

Background and aim: Herpes simplex virus is one of the most important human pathogenic viruses that may lead to oral herpes, keratoconjunctivitis and even encephalitis. A number of enzymes of the virus such as DNA polymerase can be targeted antiviral drugs. Acyclovir is used to treat infections of the virus, today due to drug resistance, need to do more research on finding new drugs, especially herbal medicines has increased. This study aimed to investigate the antiviral effect of methanol extract of Chelidonium majus compared with acyclovir against the virus in HeLa cell culture. Methods: In this experimental study, the toxicity of Chelidonium majus L. methanol extract and acyclovir on HeLa cell was determined with both MTT and Trypan blue methods. The antiviral effect of Chelidonium majus L. extract and acyclovir was evaluated in different concentration (1800- 1700- 1600- 1500- 1400 and 500- 100- 75- 50- 30-10 µg/ml) and also in different times before, after and during of virus adsorption respectively.  The virus titer was measured by tissue culture infectious dose 50 )TCID50(  method. The T-test method was used to comparing the effects of both compounds on virus. Results: The maximum non-toxic concentration of Chelidonium majus L. extract on HeLa cell was determined 1600 µg/ml that has the maximum inhibitory effect on HSV-1 replication. Acyclovir was shown low toxicity on HeLa cells.The 30 µg/ml concentration of acyclovir was considered for the next steps of the study.The highest inhibitory effect of the extract was observed 1 hour after absorption and the virus replication was suppressed completely by the acyclovir immediately after virus adsorption up to 8 hours after infection. Conclusion: The Chelidonium majus L. methanol extract has less effect than the acyclovir on inhibition of herpes simplex virus replication in a first few hours of infection. More research is needed to achieve effective compounds with antiviral activity of above extract due to increasing acyclovir resistant strains also its side effects.