بررسي تاثير سوراخ كردن مصنوعي بلاستوسيست موش بر زندهماني و ميزان بيان ژن Wnt3a

Effect of artificial collapse of mouse blastocyst on viability and Wnt3a gene expression

امروزه جهت افزايش ميزان لانه‌گزيني و حاملگي پس از انتقال رويانهاي حاصل از لقاح آزمايشگاهي ، از تكنيك‌هاي مختلف هچينگ كمكي از جمله سوراخ كردن مصنوعي بلاستوسيست استفاده مي‌شود. در اين مطالعه با سوراخ كردن مصنوعي بلاستوسيست با استفاده از ريز سوزن‌هاي تزريق كننده، كيفيت بلاستوسيست‌هاي موش با بررسي نرخ زنده‌ماني، خروج بلاستوسيست از زونا و ميزان بيان ژن Wnt3a مورد ارزيابي قرار گرفت. بلاستوسيست‌ها در دو گروه درون‌تني و برون‌تني مورد مطالعه قرار گرفتند. در هر گروه تعدادي از بلاستوسيست‌ها‌‌ با استفاده از ريز سوزن‌هاي تزريق‌كننده به روش مكانيكي سوراخ شدند و تعدادي ديگر بدون هيچ تيماري به عنوان گروه كنترل در نظر گرفته شدند. نرخ زنده‌ماني و قابليت خروج بلاستوسيست‌ها از زونا و همچنين ميزان بيان ژن Wnt3a توسط تكنيك واكنش زنجيره‌اي پليمراز در زمان واقعي در هر گروه ارزيابي گرديد. بر اساس نتايج بدست آمده در بلاستوسيست‌هاي درون‌تني و برون‌تني گروه تيمار در مقايسه با كنترل ميزان زنده‌ماني كاهش نيافت در مقابل ميزان خروج بلاستوسيست از زونا افزايش معني‌داري نشان داد. در گروه بلاستوسيست‌هاي درون‌تني ميزان بيان ژن Wnt3a افزايش معني‌دار و در گروه بلاستوسيست‌هاي برون‌تني كاهش معني‌دار يافت. سوراخ كردن مصنوعي بلاستوسيست مي‌تواند يك روش مطمئن در هچينگ كمكي بكار رود.

In recent years, using the assisted hatching techniques such as puncture of blastocyst, are used in invitro fertilization (IVF) for increase the rate of implantation. This study was designed in order to evaluate of AC effect in survival and hatching rate of mouse blastocysts by expression of Wnt3a gene. In vivo and In vitro blastocysts are obtained. Some of them in invivo and In vitro groups were collapsed with a microneedle and noncollapsed blastocysts in each group were used as a control. Evaluated survival and hatching rate and quantitative expression of Wnt3a gene in both groups was investigated by using Real time PCR. Our results revealed that AC of blastocyst in invivo and In vitro blastocysts did not improve survival rate although hatching rate had a significant difference in the collapsed blastocysts compared to noncollapsed blastocysts in both groups. The results real time PCR quantitative analysis showed that expression level of Wnt3a gene has increased in invivo blastocysts and it has decreased in invitro blastocysts comparing to control group in both treatment. AC could be effective way to improve the assisted hatching techniques.