بررسي اثر عصاره هاي متانولي و آبي گياه " كنار "Zizyphusspina Christi بر پروماستيگوت هاي انگل ليشمانيا ماژور (MHOM/IR/75/ER) با روش MTT

The evaluation of Methanolic and aqueous extracts effect of Zizyphus spinaChristi against Leishmania major (MHOM/IR/75/ER) promastigotes using MTT assay

زمينه و اهداف: ليشمانيوز بيماري زئونوز با شيوع بالا است. داروهاي مختلفي براي درمان ليشمانيوز، به كار گرفته شده است اما عوارض جانبي آنها و مقاومت به دارو، باعث شده است كه به دنبال تركيبات جديد موثري باشيم. هدف اين مطالعه ارزيابي گياه " كنار " Zizyphusspina Christi به عنوان يك منبع دارويي بود. مواد و روش كار: عصاره متانولي به روش پركولاسيون وهمچنين عصاره آبي آماده شد. پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور (MHOM/IR/75/ER) در دماي& deg C 2&±25در فاز ثابت در محيط RPMI 1640 غني شده با سرم جنين گوساله (FCS) 10% و آنتي بيوتيك پني سيلين استرپتومايسين كشت داده شدند. سپس با استفاده از روش رنگ سنجي MTT، فعاليت بيولوژيكي عصاره گياهي در مقايسه با گلوكانتيم روي پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور مورد بررسي قرار گرفت و مقدار 50IC (كه 50 %غلظت مهار كننده است) محاسبه گرديد. همه تست ها 3 بار تكرار شدند. عصاره هاي متانولي وآبي Zizyphusspina Christi و گلوكانتيم از رشد پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور در شرايط آزمايشگاه بعد از 24، 48 و 72 ساعت انكوباسيون جلوگيري بعمل آوردند. يافته ها: 50 IC گلوكانتيم 96/21 ميكروگرم بر ميلي ليتر بود و50IC براي عصاره هاي متانولي و آبي گياه " كنار " به ترتيب، 60 و 80 ميكروگرم بر ميلي ليتر بود. همه عصاره ها داراي اثرات قابل ملاحظه اي روي پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور بودند. نتيجه گيري: با توجه به اينكه عصاره الكلي و آبي " كنار " داراي اثرات ضد ليشمانيايي در محيط آزمايشگاه مي باشند، لزوم انجام آزمايشات بيشتر براي ارزيابي اثر اين عصاره ها بر روي انگل ليشمانيا در مدل حيواني احساس مي شود.

Background and Aim: Leishmaniasis is a zoonotic disease with high prevalence. Various medicines are used for treatment of Leishmaniasis but because of their side effects and drug resistance, the medical society seeks new effective compounds. The aim of this study was the evaluation of Zizyphus spina Christi as source of new medicinal factor. Materials and Methods: The methanolic extract was prepared by percolation method. Leishmania major promastigotes cultured at 25&±2°C in stationary phase in RPMI1640 medium complemented with 10% fetal calf serum (FCS) and antibiotic PenicillinStreptomycin (10,000 U/mL). By using MTT assay, the biological activity of plant extracts was evaluated in comparison with Glucantime against L.major promastigotes and IC50 values (50% inhibitory concentrations) were also studied. All tests were repeated for three times. Results: Zizyphus spina Christi extracts and glucantime inhibited the growth of promastigote forms of L.major in vitro after 24, 48 and 72 hours of incubation. IC50 of glucantime was 21.96μg/ml, and IC50 values for methanol and the aqueous extracts of Zizyphus spina Christi were 60 μg/ml and 80 μg/ml, respectively. All plant extracts had profound effects on promastigotes of L.major. Conclusions: As regards, methanol and aqueous extract of Zizyphus spinaChristi have antileishmanial effects in vitro, further works are required to appraise the exact effect of these extracts on Leishmania agents in animal models.