بررسي حساسيت PCR در تشخيص باكتري مولد بروسلوزيس توسط ژن‌هاي omp25،omp31 و bcsp31 در مبتلايان به تب مالت

Evaluation of the sensitivity of the PCR technique in detecting genes omp31, omp25 and bcsp31 in patients with brucellosis

زمينه و اهداف: تب مالت هنوز از جمله عفونت هاي شايع دركشورهاي درحال توسعه و حتي برخي كشورهاي پيشرفته بشمار مي آيد. تشخيص بيماري به وسيله كشت خون و روش هاي سرولوژيك انجام مي شود كه براي تشخيص با حساسيت و ويژگي بالاتر روش PCR پيشنهاد شده ، بنابراين هدف از اين مطالعه ارزيابي ميزان حساسيت تكنيك PCR در تشخيص ژن هاي omp31، omp25 و bcsp31 در مبتلايان به تب مالت مي باشد. مواد و روش كار: در مطالعه حاضر از 21 فرد مبتلا به تب مالت كه داراي تست هاي مثبت اليزا و رايت بودند نمونه گيري خون انجام و سپس نمونه ها در محيط كشت خونBACTEC و در دماي 37 درجه سليسيوس به مدت 5 روز انكوبه و پس از آن هر نمونه روي يك پليت حاوي بروسلا آگار كشت داده شدند. DNA استخراج شده به عنوان الگو براي تشخيص دقيق ژن هاي omp31،omp25 و bcsp31 توسط PCR به كارگرفته شدند. يافته ها و بحث: پس از انجام واكنش PCR نتايج بيانگر قدرت 100 درصدي PCR در تشخيص ژن bcsp31 47/90 درصدي براي ژن omp31 و 7/85 درصدي براي ژن omp25 بود. با توجه به قدرت 100 درصدي و وجود قطعه 223 جفت بازي bcsP31 در سه گونه اي بروسلا هاي بيماري زاي انساني، ژن bcsP31 مي تواند به عنوان يك ژن هدف مناسب و مطمئن تري نسبت به ژنهاي OMP31 و Omp25 در تشخيص بروسلوز در نمونه هاي باليني توسط روش PCR مد نظر قرار گيرد.

Background and Aim: Brucellosis is still one of the common infections in developing countries and  some developed countries. Diagnosis of the human brucellosis is mainly based on blood culture and serological tests.also in addition to determine the root cause of brucellosis, the aim of this paper is susceptibility assessment of three bcsp31, omp31 and omp25 in the diagnosis of brucellosis using PCR method among people with brucellosis. Materials and Methods: In this study, All the patients were diagnosed with positive immunological tests such as Wright and ELISA. samples of blood were cultured (BACTEC) and incubated at 37°C for 5 days and then they were cultured for 3 days on Brucella agar. DNA was extracted from the colonies by Kit. The extracted DNA was used as template for accurate diagnosis of bacterial strains with genespecific primers in PCR reactions bcsp31, omp31 and omp25. Results and Conclusions: After the PCR reaction, results show that there is 100% PCR power for diagnosis of bscp31, 90.47% sensitivity for omp31 and 85.7% sensitivity for omp25 genes. Due to the high power and specificity and existence of bcsp31 in human pathogenic species, bcsp31 gene can be considered as more appropriate and confident target gene than omp31 and omp25 genes in the diagnosis of brucellosis in clinical samples using PCR method.