مقايسه روش‌هاي مختلف نگهداري طولاني‌مدت و بقاي ايزوله‌هاي استرپتوكوك پنومونيه

Comparison different methods of longterm maintenance and survival of Streptococcus pneumoniae isolates

زمينه و اهداف: يكي از مشكلات مهم در جداسازي و تشخيص استرپتوكوكوس پنومونيه از نمونه هاي باليني، حساسيت زياد، اتوليز سريع و درنتيجه ناتواني در نگهداري ايزوله هاي پنوموكوك مي باشد. ازاين رو براي حفظ ايزوله ها به روش هاي اختصاصي نگهداري ميان مدت و طولاني مدت باكتري موردنياز است. در اين مطالعه كارايي چندين محيط كشت مختلف براي نگهداري ايزوله هاي استرپتوكوكوس پنومونيه باهم مقايسه و بررسي شد. مواد و روش كار: در سال 1394، دوسويه استاندارد پنوموكوك ATCC 49619 و ATCC 6305،30 ايزوله باليني، و30 ايزوله فلور نرمال پنوموكوك موجود از مطالعه قبلي انتخاب شدند. سپس براي نگهداري ميان مدت، محيط كشت دورسه آگار و براي نگهداري طولاني مدت، سه محيط نگه دارنده شاملSkim milkTryptoneGlucoseGlycerin (STGG)، نوترينت براث غني شده و Todd Hewitt Broth (THB) ساخته شده و كارايي آن ها در نگهداري ايزوله هاي پنوموكوك ارزيابي شد. يافته ها و نتيجه گيري: 95 درصد از ايزوله هاي كشت داده شده روي محيط دورسه پس از 70 روز و80 درصد پس از 4 ماه بعد توانايي رشد داشتند. هر سه محيط نگه دارنده طولاني مدت، تا يك سال كارايي خوبي داشتند، اما نوترينت براث غني شده توانست تا 2 سال باكيفيت بهتري باكتري را حفظ كند. تفاوتي بين ايزوله هاي جداشده از بيمار و ايزوله هاي فلور نرمال در توانايي بقا در محيط وجود نداشت. همچنين مهاجم بودن منشأ باليني ايزوله ها تأثيري روي ميزان بقاي آن ها نداشت. مي توان از محيط كشت دورسه اگار به عنوان يك روش ارزان و ساده و بسيار كاربردي براي نگهداري ميان مدت و از محيط نوترينت براث غني شده براي نگهداري بلندمدت ايزوله هاي پنوموكوك در آزمايشگاه تشخيص طبي استفاده كرد.

Background and Aim: One of the major problems for the isolation and detection ofS. pneumoniae from clinical specimens, high sensitivity, rapid autolysis and thus the inability to hold isolates of pneumococcus. So, it is essential to use specific techniques for the preservation of the organism. In this study several different cultures for S. pneumoniae isolates were compared and evaluated. Materials and Methods: In 2014, 2 ATCC standard , 30 clinical, and 30 normal flora pneumococcal available isolates were selected from a previous study. Dorset egg medium was prepared for midterm preservation, three storage environments, including Skim milkTryptoneGlucoseGlycerin (STGG), nutrient broth enriched and Todd Hewitt Broth (THB) was constructed to longterm preservation, and their performance on maintenance pneumococcal isolates was assessed. Results and Conclusions: 95% of the isolates cultured on Dorset after 70 days and 80% after four months later had the ability to grow. All three longterm storage environment, had a good performance for one year but enriched nutrient broth could keep bacteria with but betterquality up to 2 years. There is no difference between isolates from the patients and isolates from normal flora to survive in the environment. Also aggressive origin of iclinical isolates had no effect on their survival rate. Dorset egg (DE) medium can be considered as a simple, low cost and efficient, medium for midterm preservation and enriched nutrient broth for long term storage of pneumococcal isolates in clinical laboratories.