شناسايي دو گونه ساقه خوار (Sesamia nonagrioides (Lep.: Noctuidae و S. cretica به روش DNA باركدينگ

Identification of two stem borers, Sesamia nonagrioides (Lep.: Noctuidae) and S. cretica by DNA barcoding

تاكنون دو گونه از شب‌پره‌هاي جنس Sesamia Guenée, 1852 به نام هاي (Sesamia nonagrioides (Lefèbvre, 1827 و S. cretica Lederer, 1857 به عنوان آفات كشاورزي از ايران گزارش‌ شده است. تحقيق حاضر به روش DNA باركدينگ و به منظور تأييد شناسايي‌هاي مورفولوژيك موجود و يافتن راهي براي تشخيص سريع و مطمئن اين دو گونه در زمان عدم دسترسي به تخصص تاكسونوميك انجام گرديد. نمونه‌‌ها از روي گياهان ميزبان ذرت، نيشكر و برنج در استان‌هاي خوزستان و فارس جمع‌آوري و به روش تاكسونومي كلاسيك شناسايي شد. پس از استخراج DNA از نمونه‌ها با استفاده از آغازگرهاي مناسب، ژن COI تكثير و توالي‌يابي شد. پس از همرديف سازي توالي‌ها، باركد گپ تخمين زده شد و ميزان واگرايي نوكلئوتيدها مشخص شد. فواصل ژنتيكي بين اين دو گونه به همراه پنج گونه نزديك ديگر از جنس Sesamia توسط درخت اتصال همسايه (Neighbour-joining) نمايش داده شد. بدين منظور از مدل جايگزيني نوكلئوتيدي (K2P) استفاده شد. نتايج حاصله گونه‌هاي S. nonagrioides و S. cretica را به خوبي از هم متمايز نمود و شناسايي‌هاي مورفولوژيك را تاييد كرد. استفاده از اين نتايج در شناسايي سريع و دقيق دو گونه مذكور و نيز شناسايي مراحل نابالغ آنها توصيه مي‌شود.

Two species of the genus Sesamia, Sesamia nonagrioides (Lefèbvre, 1827) and S. cretica Lederer, 1857, have been reported as agricultural pests in Iran. DNA barcoding was used to confirm morphological identifications and achieve a reliable and rapid species identification of these pests when the expertise is limited. Specimens were sampled from host plants of maize, sugarcane and rice in Khuzestan and Fars provinces and identified by a classical taxonomy. The COI region was amplified from extracted DNA by appropriate primers and sequenced. The sequences were aligned and barcode gap, nucleotide divergence were calculated. Genetic distances between sequences of the two mentioned species and five closely related Sesamia species were evaluated based on a Neighbour-joining tree, using the Kimura 2-parameter distance model. Results could make a satisfactory species delineation and approved morphological identifications for S. nonagrioides and S. cretica. It is recommended to use these results for a rapid and precise species identification of these two species both in the immature and adults stages.