تاثير سايتوتوكسيك مهاركننده PI3Kδ در رده سلولي لوسمي پروميلوسيتيك حاد

Cytotoxic effect of PI3Kδ inhibitor in acute promyelocytic leukemia cells

سابقه و هدف مسير PI3K/Akt كه در تنظيم رشد سلولي و تكثير نقش مهمي ايفا مي كند، تقريباً در 70%-50% بيماران APL فعاليت بالايي را نشان مي دهد. مشخص شده است كه در سلول هاي لوسميك اين بدخيمي، فعاليت PI3K عمدتاً ناشي از افزايش بيان ايزوفرم p110δ مي باشد. در اين مطالعه بر آن شديم تا اثر بخشي داروي Idelalisib را كه يكي از مهم ترين مهاركننده هاي p110δمي باشد، در سلول هاي NB4 مشتق از APL بررسي كنيم. مواد و روش هادر يك مطالعه تجربي، اثرات مهاري دارو بر فعاليت متابوليك و زنده ماني سلول هاي NB4 بررسي شد. هم چنين از روش فلوسايتومتري جهت بررسي آپوپتوز و از روش Quantitative RT-PCR جهت بررسي تغيير بيان mRNA ژن هاي دخيل در آپوپتوز استفاده شد. يافته ها نتايج نشان داد كه Idelalisib نه تنها باعث كاهش زنده ماني و فعاليت متابوليك سلول هاي NB4 به صورت وابسته به دوز و زمان شد، بلكه متوجه شديم كه اثرات سايتوتوكسيك اين دارو از طريق فعال كردن مسير آپوپتوتيك مي باشد. هم چنين در بررسي مكانيسم مولكولي دخيل در القاي مرگ سلولي مشخص شد كه داروي Idelalisib از طريق افزايش بيان ژن هاي پروآپوپتوتيك Bax و PUMA و كاهش بيان ژن آنتي آپوپتوتيك Mcl-1 اثر خود را اعمال مي كند. نتيجه گيري با توجه به فعال بودن p110δ در بيماران APL و هم چنين اثر بخشي داروي Idelalisib در القاي اثرات سايتوتوكسيك در سلول هاي پروميلوسيتيك NB4، مي توان چنين پيشنهاد كرد كه اين دارو مي تواند به عنوان يك راهكار درماني مناسب، چه به صورت منوتراپي و چه به صورت داروي مكمل همراه با داروهاي متداول مورد استفاده، در بيماران APL مد نظر گرفته شود.

Background and Objectives PI3K/Akt pathway plays a key role in cell growth and proliferation. Constitutive activation of this pathway is detectable in 50-70% of patients with acute promyelocytic leukemia (APL). Previous studies showed that PI3K activity in APL cells is mainly due to overexpression of p1108 isoform. In an effort to investigate the effect of PI3K inhibition in acute promyelocytic leukemia, APL-derived NB4 cells were subjected to different concentrations of Idelalisib, as a potent pl108-specific inhibitor. Materials and Methods In this experimental study, we examined the effect of Idelalisib on the viability and metabolic activity of NB4 cells. Moreover, flowcytometery and quantitative RQ-PCR were applied to investigate both induction of apoptosis and transcriptional activity of apoptosis-related genes, respectively. Results The results revealed that Idelalisib not only decreased cell viability and metabolic activity in a dose- and time-dependent manner, but also induced cell death through the apoptotic pathway in NB4 cells. Our data also delineated that Idelalisib-induced apoptosis was mediated through induction of Bax and PUMA coupled with decreased expression of Mci-1. Conclusions Based on P1108 activity in APL patients and the potent efficacy of Idelalisib in NB4 cells, it is tempting to suggest this inhibitor, as either single agent or in combination with common medications, for the treatment of patients with APL.