شناسايي ژن‌هاي مولد فسفوليپاز و پيلي‌تيپ IV در ايزوله‌هاي باليني سودوموناس آئروژينوزا با مقاومت چند دارويي

Detection of phospholipase and type IV pili genes in clinical isolates of multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa

زمينه و هدف : سودوموناس آئروژينوزا باكتري فرصت‌طلب با عوامل بيماري‌زايي متعدد از جمله فسفوليپاز C و پيلي نوع IV است. از مشكلات عمده عفونت‌هاي سودوموناسي، مقاومت آنتي‌بيوتيكي آن است كه اغلب درمان چنددارويي براي آن پيشنهاد مي‌گردد. اين مطالعه به منظور شناسايي ژن‌هاي مولد فسفوليپاز و پيلي‌تيپ IV در ايزوله‌هاي باليني سودوموناس آئروژينوزا با مقاومت چند دارويي انجام شد. روش بررسي : اين مطالعه توصيفي روي 93 سويه سودوموناس آئروژينوزا جداسازي شده از نمونه‌هاي باليني (ادرار، خون، ترشحات تنفسي، مدفوع، خلط و زخم) انجام شد. پس از تعيين هويت و تاييد سويه‌ها با تست‌هاي بيوشيميايي، الگوي حساسيت آنتي‌بيوتيكي به روش كربي-بائر و براساس استانداردهاي CLSI انجام شد. DNA ايزوله‌ها استخراج و با روش PCR و پرايمرهاي اختصاصي ژن‌هاي plcH ، plcN ، pilA و pilB ارزيابي گرديد. يافته‌ها : بيشترين ميزان مقاومت آنتي‌بيوتيكي مربوط به سفوكسيتين (95.6%) و كمترين درصد مقاومت مربوط به آميكاسين (26.8%) بود. 80.6% ايزوله‌ها مقاومت چنددارويي داشتند. در بين 75 ايزوله با مقاومت چنددارويي، فراواني ژن‌هاي plcH ، plcN، pilA و pilB به ترتيب 97.3%، 49.3%، 26.6% و 17.3% تعيين شد. نتيجه‌گيري : با توجه به فراواني بالاي ژن فسفوليپاز C در ايزوله‌هاي سودوموناس آئروژينوزا با مقاومت چنددارويي جداسازي شده از منابع باليني مختلف، به‌نظر مي‌رسد اين عامل ويرولانس نقش مهمي در فرايند بيماري‌زايي اين باكتري ايفا كند. همچنين نتايج اين مطالعه اهميت كمتر پيلي در ايزوله‌هاي با مقاومت چنددارويي را نشان داد.

Background and Objective: Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen with numerous virulence factors such as phospholipase and type IV pili. The emergence of multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa has become a serious public health threat worldwide. This study was done to determine the frequency of plcH, plcN, pilA and pilB genes in multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa isolated from clinical samples. Methods: In this cross-sectional study, 93 isolates of Pseudomonas aeruginosa collected from different clinical samples from hospitals of Zanjan, Iran during 2013-14. After identification of isolates by biochemical tests, antibiotic susceptibility testing (Kirby-Bauer) was performed according to CLSI guidelines. Total DNA extracted and PCR was done to detect of plcH, plcN, pilA and pilB genes. Results: Among 93 of Pseudomonas aeruginosa isolates, the highest antibiotic resistance related to Erythromycin and Cefoxitin (95.6%) and the lowest resistance related to Amikacin (26.8%). 80.6% of isolates were multidrug resistant (MDR). Out of 75 MDR isolates, the frequency of plcH, plcN, pilA and pilB genes was 97.4%, 49.3%, 26.6% and 17.3%, respectively. Conclusion: According to high frequency of phospholipase C gene (plcH) in MDR Pseudomonas aeruginosa isolates which isolated from different clinical samples, presumably this virulence factor plays an important role in pathogenesis of this bacterium.