ارزيابي چندشكلي ژن GDF9 و ارتباط آن با صفات اسپرم در قوچ سنجابي

Evaluation of GDF9 gene polymorphism and its relationship with sperm quality in Sanjabi ram

اين مطالعه جهت شناسايي جهش موجود در ژن GDF9با استفاده از روش PCR-RFLPو ارتباط احتمالي آن با صفات كيفيت اسپرم و بيومتري بيضه، انجام گرفت. براي اين منظور نمونه‌گيري از خون و اسپرم 96 رأس قوچ نژاد سنجابي به عمل آمد. پس از استخراجDNA ، تكثير قطعه‌‌ 462 جفت‌بازي از اگزون يك ژن GDF9 با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي صورت گرفت و سپس هضم آنزيمي محصولات PCR با استفاده از آنزيم برشي HhaI انجام شد. نتايج حاصل از هضم، عدم وجود جهش از نوع G به Aرا در جمعيت مورد مطالعه تأييد كرد و تمامي نمونه‌ها در اين جايگاه داراي ژنوتيپ وحشي (GG) بود. با توجه به تفاوت‌هاي مشهود در صفات كيفي اسپرم در قوچ هاي نمونه‌گيري شده و هم‌چنين بروز دوقلوزايي در ميش‌هاي موجود در گله‌هاي گوسفند نژاد سنجابي، نتايج اين تحقيق نشان داد كه مطالعات ديگري در جهت شناسايي جهش در نواحي ديگر اين ژن و ژن‌هاي ديگر باروري بايد صورت گيرد تا نواحي ژنومي مسئول صفات كيفي اسپرم در قوچ‌ها و نيز دوقلوزايي ميش‌هاي نژاد سنجابي به‌منظور بهبود باروري در اين گله‌ها شناسايي شود.

This study was conducted in order to identity mutation in GDF9 gene and possible association with the sperm quality and testicular biometric traits using PCR-RFLP method. For this purpose, the blood and sperm samples were collected from 96 rams belonged to Sanjabi breed. After the extraction of DNA, amplification of 462bp fragment including GDF9 gene exon 1 region was performed using a pair of specific primers. Then, enzyme digestion of products was performed using Hhal restriction enzyme. The results of digestion process approved absence of G to A mutation in the studied population and all samples showed to be wild-type genotype (GG) in this position. In regard to significant differences in sperm quality traits in sampled rams and as well as the incidence of twining in Sanjabi breed ewes, the results of this study showed that other studies must be performed in order to identify mutations in other regions of this gene and other genes to know responsible genomic regions for the sperm quality in rams and also twining in Sanjabi breed ewes in order to improve fertility in flock.