اندازه‌گيري اثر مهاري عصاره‌ آبي هفت گياه دارويي بر فعاليت آنزيم گزانتين اكسيداز به روش برون‌تني

In vitro evaluation of xanthine oxidase inhibitory activity of aqueous extract of seven medicinal herbs

تولید بیش از اندازه اسید اوریك بوسیله آنزیم گزانتین اكسیداز باعث بروز بیماری نقرس می‌شود. مهاركننده‌های این آنزیم ازجمله داروی آلوپورینول از مهمترین داروهای ضد نقرس موجود می‌باشند. گیاهان دارویی ازجمله منابع طبیعی در دسترس هستند كه ممكن است در درمان نقرس مؤثر و مفید باشند. در این مطالعه اثر مهاری عصاره آبی گیاهان كنگر فرنگی (Cynara scolymus L.)، بادیان رومی (Trachyspermum copticum (L.) Link)، بابونه (Matricaria chamomilla L.)، عشقه (Hedera helix L.)، ذرت (Zea mays L.)، زبان‌گنجشك (Fraxinus excelsior L.) و هوفاریقون (Hypericum perforatum L.) بر آنزیم گزانتین اكسیداز ارزیابی شد. آزمایش بدین شرح است كه تحت شرایط كنترل شده، گزانتین در مجاورت آنزیم گزانتین اكسیداز به اسیداوریك تبدیل می‌شود. میزان جذب اسید اوریك در طول موج 295 به‌وسیله اسپكتروفتومتر UV قابل اندازه‌گیری می‌باشد. افزودن عصاره‌های گیاهی یا آلوپورینول (به‌عنوان گروه كنترل) به محلول حاوی آنزیم، با مهار آن می‌تواند باعث كاهش تولید اسید اوریك شود. ابتدا اثر مهاری آلوپورینول بر آنزیم و تكرارپذیری روش طی سه سری آزمایش مورد ارزیابی قرار گرفت و EC50 معادل g/mlμ43/0 بدست آمد. بعد از تثبیت روش، اثر عصاره‌های گیاهی در غلظتهای mg/ml 1/0، 5/0، 1، 5/1، 2 و 3 بر آنزیم مورد بررسی قرار گرفت. بابونه با 68% مهار آنزیم (001/0P<) در غلظت mg/ml3 دارای اثر بارز مهاری و هوفاریقون و كنگرفرنگی به‌ترتیب با 36% (001/0P<) و 21% (001/0P<) مهار آنزیم، اثر متوسط و بقیه گیاهان فاقد اثر مهاری بر آنزیم بودند. نتایج ما نشان داد كه بخشی از اثرهای ضد نقرس گزارش شده بابونه، كنگرفرنگی و هوفاریقون بدلیل مهار آنزیم گزانتین اكسیداز در بدن می‌باشد.

Over production of uric acid by xanthine oxidase (XO) causes gout. XO inhibitors for example allopurinol are the most important available anti gout drugs. Medicinal herbs are available natural sources that may be useful for the treatment of gout. In this study the inhibitory activity of aqueous extracts of Matricaria chamomilla L., Hypericum perforatum L., Fraxinus excelsior L., Zea mays L., Trachyspermum copticum (L.) Link, Cynara scolymus L. and Hedera helix L. were measured. In these experiments, under controlled conditions xanthine turns into uric acid by XO. Uric acid absorbance was measured at 295 nm using a UV spectrophotometer. Adding allopurinol (as positive control) or aqueous extracts to the solution containing XO, can decrease uric acid production by inhibition of this enzyme. At first, XO inhibitory activity of allopurinol and reproducibility of the method was evaluated by conducting three experiments. The results showed an EC50= 0.43 μg/ml for allopurinol. Then, XO inhibitory activity of aqueous extracts at 0.1, 0.5, 1, 1.5, 2 and 3 mg/ml were measured. Matricaria chamomilla could inhibit enzyme up to 68% (P< 0.001) while maximum XO inhibitory activities of Hypericum perforatum and Cynara scolymus were 36% (P< 0.001) and 21% (P< 0.001) respectively. Other extracts did not have any significant effect on XO. Our obtained results showed that part of anti gout effects of Matricaria chamomilla, Hypericum perforatum and Cynara scolymus is due to XO inhibition.