شناسايي ژن‌هاي‎‌‎ cmlA/tetR ‎، bla PSE-1‎‌ و blaTEM و ‌‎sip B ‌در سويه ‌هاي سالمونلا ‌با روش Multiplex-PCR و تعيين الگوي مقاومتي آنها ‌

Detection of ‎‌‎ cmlA/tetR, ‎‌bla PSE-1, bla TEM and sip B in the ‎Salmonella strains by Multiplex-PCR method and their antibiotic ‎resistance pattern

سابقه و هدف: گاستروانتريت ناشي از سالمونلا در انسان­ها شايع است و به عنوان يك معضل جهاني در بهداشت عمومي مطرح است. اين مطالعه به منظور شناسايي شناسايي ژن­هاي‎‏‎cmlA/tetR ‎، ‏bla PSE-1‎‏ و ‏blaTEM‏ و sip B ‏در سويه هاي سالمونلا ‏با روش ‏Multiplex-PCR و تعيين پروفايل آنتي بيوتكي آنها انجام شد. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي-مقطعي، تعداد 163 نمونه كلينيكي از بيماران ارجاع داده شده به بيمارستان حضرت رسول اكرم (ص) جمع آوري شد. تست حساسيت آنتي بيوتيكي با استفاده از روش انتشار از ژل و بر اساس دستورالعمل CLSI انجام شد. سپس M-PCR با استفاده از توالي هاي اليگونوكلئوتيدي ويژه براي شناسايي ژن­ هاي تحت مطالعه انجام شد. يافته­ ها: از 163 نمونه جمع آوري شده، 48 (۲۹/۴%) سالمونلا به دست آمد كه 25 (۵۲/۱%) سويه سالمونلا اينتريتيديس، 14 (۲۹/۲%) سالمونلا تايفي موريوم و 9 (۱۸/۷%) سالمونلا اينفنتيس بودند. آناليز مقاومت آنتي بيوتيكي نشان داد كه بيشترين مقاومت مربوط به مربوط به تتراسيكلين (27 جدايه؛ ۵۶/۲%) و پس از آن استرپتومايسين و كلرامفنيكل (15 ايزوله؛ ۳۱/۲%) بود. تمامي ايزوله­ ها (48 جدايه؛ 100%) به ايمي­پنم، آميكاسين، جنتامايسين و تريمتوپريم/سولفامتوكسازول حساس بودند. نتايج M-PCR مشخص كرد كه ۶۲/۵% و ۱۶/۶% از گونه هاي سالمونلا به ترتيب حامل ژن هاي cml/tetR و sipB بودند. نتيجه­ گيري: تشخيص و تعيين ژنوتيپ ژن­هاي حدت و مقايسه آن با وضعيت جهاني يك نياز اساسي در كنترل و پيشگيري از بروز سالمونلوز در مقاصد صنعتي است.

Background: Gastroenteritis due to Salmonella is common in human and considered as a global ‎dilemma of public health. This study was done to determine cmlA/tetR, ‎‌bla PSE-1, bla TEM and sip B ‎in the Salmonella strains by Multiplex-PCR method and their antibiotic susceptibility profile. ‎ Materials and methods: In this cross-sectional study, 163 clinical samples were obtained from ‎patients admitted to Hazrat-e Rasool General Hospital. The antibiotic susceptibility test was determined ‎using the disk diffusion method agreeing with CLSI guideline. Then, M-PCR was achieved for ‎determination of these target genes by the specific oligonucleotides primers. ‎ Results: Of 163 collected samples, 48(29.4%) Salmonella spp., were obtained, which 25(52.1%) were ‎S. enteritidis, 14(29.2%) S. typhimurium and 9(18.7%) S. infantis. Antibiotic resistance analysis showed ‎that the highest resistance rate were related to tetracycline (n: 27, 56.2%) and then streptomycin and ‎chloramphenicol (n: 15, 31.2%). All isolates (n: 48, 100%) were susceptible to imipenem, amikacin, ‎gentamycin and trimethoprim/sulfamethoxazole. The MPCR results revealed that 62.5% and 16.6% of ‎Salmonella spp., isolates carried cml/tetR and sipB genes, respectively. ‎ Conclusion: According to our results, detection and genotyping of virulence genes and comparison ‎with global ranging is a basic requirement in the control and prevention of salmonellosis in industrial ‎purposes.‎ Keywords: cmlA/tetR, PSE-1, TEM, sip B, Salmonella, Multiplex-PCR