شناسايي گونه هاي مايكو باكتريوم جدا شده از بيماران شهر تهران طي سال هاي 1393 تا 1394 با استفاده از روش HPLC

Identification of Mycobacterium species isolated from patients using highperformance liquid chromatography in Tehran during 2014-2015

سابقه و هدف: مايكوباكتريوم ­ها به ­غير از كمپلكس مايكوباكتريوم­ هاي توبركلوزيس و عامل بيماري جذام، به­ عنوان مايكوباكتريوم غير توبركلوزيس (NTM) محسوب مي­ گردند. تشخيص سريع و درست NTM براي درمان و كنترل بيماري­ هاي ناشي از اين ميكروارگانيسم­ ها داراي اهميت ويژه مي­ باشد. هدف از اين مطالعه شناسايي گونه هاي­ مايكوباكتريوم­ جدا شده از بيماران شهر تهران با استفاده از روش كروماتوگرفي مايع با عملكرد بالا (HPLC) مي­ باشد. مواد و روش ­ها: در اين بررسي مقطعي 20 ايزوله باليني مايكوباكتريوم ارجاع شده به آزمايشگاه مسعود تهران طي­ سال­ هاي 1394-1393 مورد بررسي قرار گرفت. ايزوله­ ها از نمونه­ هاي مختلف شامل: خلط، ادرار، خون و مايعات استريل بدن جمع ­آوري شد. كروماتوگرافي با شيب گراديانت از متانول 98 درصد و كلريد متيلن 2 درصد شروع شد و با متانول 35 درصد و كلريد متيلن 65 درصد به انجام رسيد. نتايج: از 20 ايزوله­ هاي باليني جداشده، 8 ايزوله (40 درصد) مايكوباكتريوم آبسه ­سوس، 6 ايزوله (30 درصد) مايكوباكتريوم توبر­كلو­زيس، 3 ايزوله (15 درصد) مايكوباكتريوم اينتراسلولار و 3 ايزوله (15 درصد) مايكوباكتريوم فورتئيتوم بودند. نتيجه­ گيري: جهت درمان مناسب در افرادي كه مشكوك به عفونت سلي هستند، تشخيص مايكوباكتريوم توبركلوزيس از NTM بايد با سرعت انجام گيرد. در اين خصوص استفاده از روش HPLC در كشت­ هاي مثبت جدا شده از نمونه ­هاي باليني به­ عنوان روشي سريع، مقرون­ به ­صرفه، اختصاصي و قابل اعتماد مطرح مي­ باشد.

Background: Non-tuberculous mycobacteria (NTM) are defined as mycobacteria other than Mycobacterium tuberculosis (MTB), which do not cause tuberculosis or leprosy. Early and precise diagnosis of NTM is particularly important for the correct epidemiological control and specific treatments. The aim of this study was to identify the mycobacterium species isolated from patients referred to hospitals in Tehran using the high-performance liquid chromatography (HPLC) method. Materials and Methods: In this cross-sectional descriptive study, a collection of isolates (n=20) was obtained from clinical specimens submitted to the Masoud Laboratory in Tehran, Iran, during 2014-2015. The strains were isolated from sputum, urine, blood, and various sterile body fluid specimens. Chromatography was conducted at a flow rate with a curvilinear gradient of methanol and methylene chloride, beginning at 98% methanol containing 2% methylene chloride and ending at 35% methanol contained in 65% methylene chloride. Results: From a total of 20 clinical isolates, 8 isolates (40%) were identified as Mycobacterium abscessus, 6 isolates (30%) M. tuberculosis, 3 isolates (15%) M. intracellulare and 3 isolates (15%) M. fortuitum. Conclusion: For the proper treatment, rapid differentiation between MTB and NTM should be performed in persons who are diagnosed with or are suspected of having infectious TB disease. So, the HPLC method can be suggested as a cost-effective, specific and reliable method for rapid identification of MTB and differentiation of NTM strain from positive cultures isolated from clinical specimens.