شناسايي فنوتيپي و مولكولي ژن هاي مولد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف TEM-1 و SHV-1 در جدايه هاي اشريشيا كولاي مولد عفونت ادراري

Phenotypic and molecular detection of esbl-producing genes tem-1 and shv-1 in uropathogenic escherichia coli isolates

زمينه: انتشار سويه هاي پاتوژن حامل ژن هاي بتالاكتامازهاي وسيع الطيف (Extended-spectrum beta-lactamases، ESBLs) به عنوان يكي از نگراني هاي عمده ي بهداشتي در سطح دنيا مطرح است. اين ژن ها باعث ناكارآمدي آنتي بيوتيك هاي بتالاكتام در درمان بيماريهاي عفوني شده اند. هدف از اين مطالعه تعيين فراواني ژن هاي بتالاكتامازي TEM - 1 و SHV - 1 در جدايه هاي اشريشيا كولاي مولد عفونت ادراري در شهرستان خرم آباد بود. روش كار: 100 جدايه اشريشيا كولاي از بيماران مبتلا به عفونت هاي ادراري، از چندين آزمايشگاه باليني مختلف در شهرستان خرم آباد جمع آوري گرديد. اصالت جدايه ها با انجام آزمايشات بيوشيميايي مورد تاييد قرار گرفتند. جدايه هاي ESBLs مثبت با روش ديسك تركيبي بر اساس دستور العمل موسسه استاندارد (CLSI) مشخص گرديدند و در ادامه تمامي جدايه هاي مثبت با آزمون PCR از نظر وجود ژن هاي TEM-1 و SHV-1 مورد بررسي قرار گرفتند. يافته ها: 31 نمونه (31%) از مجموع 100 نمونه ي اشريشيا كولاي با توجه به نتايج آزمون هاي ديسك تركيبي، ESBL مثبت تشخيص داده شدند. تجزيه و تحليل نمونه ها با روش PCR و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي نشان داد كه 18 جدايه (58/06%) حاوي ژن هاي بتالاكتامازي رمزگذاري شده براي TEM بودند، در حالي كه هيچ كدام از جدايه ها ژن SHV را حمل نمي كردند. نتيجه گيري: تحقيق اخير ميزان شيوع نسبتا بالاي ژن هاي مقاومت نسبت به سفالوسپورين هاي نسل سوم در بين جدايه هاي اشريشيا كولاي را نشان داده كه حاكي از چالش در درمان موفقيت آميز با آنتي بيوتيك هاي رايج است.

Background: Spread of pathogenic strains carrying genes Extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) is one of the major health concerns in the world. These genes caused due to the inefficient beta-lactam antibiotics in the treatment of infectious diseases. The purpose of this study was to determine the prevalence of TEM-1 and SHV-1 beta-lactamase genes in uropathogenic E. coli isolates from the city of Khorramabad. Methods: A total of 100 E. coli isolates were collected from patients with urinary tract infections in clinical laboratories from city of Khorramabad. Originality isolates were confirmed by biochemical tests. ESBLs positives isolates were determined by using a combined disk based instruction the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) and then all the positive isolates were studied by PCR assay for the presence of genes TEM-1 and SHV-1. Results: Thirty one (31%) out of 100 E. coli isolates were ESBL positive based on the results of combined disc tests. PCR analysis using the specific primers revealed that 18 isolates (58.06%) contained β–lactamases genes encoding TEM, and while none of isolates did not carry SHV gene. Conclusion: The relatively high prevalence of resistance genes to third generation of cephalosporins among the E. coli isolates was found which indicates a challenge in successful treatment with current antibiotics.