بررسي اثرات سايتوتوكسيك فراكسيون بوتانولي گياه Allium affine Ledeb بر روي رده هاي سلولي سرطان پستان و تخمدان

Cytotoxic Effects of Allium affine Ledeb Butanolic Fraction on Breast and Ovary Cancer Cell Lines

مقدمه: از ميان تركيبات موجود در گياهان جنس Allium، استروييد ساپونين هاي استخراج شده از اين گياهان بر روي بسياري از رده هاي سلولي سرطاني داراي اثرات سايتوتوكسيك مي باشند. اين تحقيق به بررسي اثرات سايتوتوكسيك فراكسيون بوتانولي غني از استروييد ساپونين هاي گياهAllium affine به عنوان يكي از گونه هاي مهم آليوم در كشورمان پرداخته است. روش بررسي: فراكسيون بوتانولي پياز هاي گياه به كمك روش عصاره گيري 4 مرحله اي و به كمك حلال هاي با قطبيت متفاوت استخراج و به كمك دستگاه فريز دراير خشك شد. به منظور بررسي اثر فراكسيون بوتانولي گياه بر روي رشد و تكثير رده هاي سلولي MCF-7، MDA-MB231 (سرطان پستان) و OVCAR-3 (سرطان تخمدان) از تست MTT استفاده گرديد. غلظت هاي مختلف از فراكسيون بوتانولي گياه (200-۰/۱ ميكروگرم/ ميلي ليتر) به سلول ها اضافه شد و 48 ساعت بعد از سپري شدن زمان تيمار، شدت جذب محلول چاهك ها در طول موج 570 نانومتر اندازه گيري و در صد سلول هاي زنده نسبت به گروه كنترل محاسبه شد. نتايج: نتايج حاصل از آزمون MTT بعد از تيمار 48 ساعته در تمامي رده هاي سلولي كاهش وابسته به غلظت فعاليت سوكسينات دهيدروژناز و مهار رشد سلول ها را نسبت به نمونه كنترل نشان داد (P<0.01). بهترين اثرات سايتوتوكسيك فراكسيون مورد بررسي در مورد رده سلولي سرطان تخمدان OVCAR-3 (IC50 برابر با 7.13±0.94 ميكروگرم/ ميلي ليتر) مشاهده شد. نتيجه گيري: فراكسيون بوتانولي گياه A. affine داراي اثرات سايتوتوكسيك بر روي سلول هاي سرطاني مورد بررسي بويژه رده سلولي سرطان تخمدان است. با توجه به اثرات مطلوب مشاهده شده به نظر مي رسد كه اين فراكسيون حاوي استروييد ساپونين هاي با اثرات سايتوتوكسيك قابل توجه باشد.

Background: Among the secondary metabolites isolated from Allium species، steroidal saponins are more important for their cytotoxic activities on a variety of cancer cell lines. Current study has investigated the cytotoxic activity of saponin-riched butanolic fraction of Allium affine، an important edible Allium species of Iran. Objective: This study was conducted to evaluate cytotoxic activity of saponin-riched fraction of Allium affine Ledeb on breast and ovarian cancer cell lines. Methods: Bulbs of the plant were extracted respectively by hexane، chloroform، chloroform-methanol (9-1) and methanol in a stepwise method with increasing solvent polarity. The methanol extract was then partitioned between water and butanol and the final dried butanolic fraction was used for further cytotoxicity assay. MCF-7، MDA-MB231 and OVCAR-3 cell lines were tested for cytotoxic activity، using different concentrations of butanolic fraction (0.1-200 µg/ml) by MTT assay. After the incubation time (48 h)، the percentage of the viable cells was determined by ELISA reader instrument in 570 nm. Results: All of the cell lines tested in this investigation exhibited a dose-dependent decrease in succinate dehydrogenase activity against the control and significant dose-dependent inhibition of the growth in all concentrations and cell lines were observed (P<0.01). The most cytotoxic activity was observed for OVCAR-3 cell line (IC50= 7.13±0.94 µg/ml). Conclusion: The butanolic fraction of A. affine exhibited a significant cytotoxic activity on investigated cell lines، especially OVCAR-3، which is in agreement with other studies conducted on different Allium species. According to the results، it seems that the butanolic fraction of this plant contains cytotoxic components، especially steroidal saponins، and the phytochemical study of the constituents is suggested.