كليدواژه :
زيست سنجي , سوسك برگ خوار سيب زميني , كينتيك مهار آنزيم , زايموگرام , رسوب دهي پروتيين با سولفات آمونيوم
چكيده فارسي :
چكيده
گياهان داراي مجموعه اي از مولكول هاي پروتييني هستند كه قادر به ايجاد اختلال در هضم غذا در حشرات گياه خوار مي باشند و مي توانند در كنترل آفات مورد استفاده قرار گيرند. در اين تحقيق، مهار آنزيم آلفا-آميلاز گوارشي سوسك برگ خوار سيب زميني (Leptinotarsa decemlineata Say) توسط عصاره ي پروتييني بذر كلزا (Brassica napus L. cv. (Karaj3 بررسي شده است. حداكثر اثر مهاري عصاره ي پروتييني روي فعاليت آلفا-آميلاز در اسيديته ي پنج بود. چهار جز پروتييني عصاره ي بذر كلزا 30-0، 50-30، 70-50 و 100-70% اشباع با نمك سولفات آمونيوم، به ترتيب روي آلفا-آميلاز گوارشي لارو سن چهار سبب 0، 52، 12 و 0% مهار گرديدند. جز پروتييني 50-30? به ترتيب باعث 84، 86، 74، 52 و 37% كاهش فعاليت آلفا-آميلاز سنين 1، 2، 3، 4 و حشرات كامل شد. سنجش كينتيك مهار آلفا-آميلاز حشرات كامل توسط جز پروتييني 50-30% انجام شد و مهار از نوع نارقابتي تعيين گرديد. در زايموگرام و بررسي اثر مهاركننده در ژل، مهار آنزيم به صورت كاهش شدت نوارها مشاهده شد. در انجام زيست سنجي، از برگ هاي ارقام سيب زميني آگريا، بورن، پيكاسو و ماركز استفاده گرديد. عصاره ي پروتييني زماني كه روي برگ هاي تيمار شده مورد تغذيه لاروها قرار گرفت؛ در هيچ كدام از ارقام، زمان پوست اندازي لاروهاي سن سه به چهار نسبت به شاهد، افزايش معني داري مشاهده نشد؛ در ارقام پيكاسو و ماركز سبب كاهش معني دار وزن لارو سن چهار نسبت به شاهد گرديد؛ درصد لاروهاي سن چهار ظاهر شده در ارقام آگريا، پيكاسو و ماركز نسبت به شاهد به طور معني داري كاهش يافت و در رقم آگريا، فعاليت آلفا-آميلاز لارو سن چهار در مقايسه با شاهد به طور معني داري كاهش پيدا كرد.
واژه هاي كليدي: رسوب دهي پروتيين با سولفات آمونيوم، زايموگرام، زيست سنجي، سوسك برگ خوار سيب زميني، كينتيك مهار آنزيم.
چكيده لاتين :
Abstract
Plants have a set of protein molecules that are able to interfere with the digestion of herbivore insects and can be used as an approach to pest control. In this study, digestive alpha-amylase inhibition of Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say), by proteinaceous seed extract of rapeseed, Brassica napus L. cv. Karaj3 was investigated. The most inhibitory effect of proteinaceous extracts on the alpha-amylase activity was at pH 5. Four precipitated rapeseed proteinaceous fractions; 0-30, 30-50, 50-70, and 70-100% saturation by ammonium sulfate, caused 0, 52, 12 and 0% inhibition on the gut alpha-amylase activity of the fourth instar larvae, respectively. Fraction 30-50% resulted in 84, 86, 74, 52 and 37% reduction in the L1, L2, L3, L4 and adult’s gut alpha-amylase activity, respectively. The enzyme inhibition kinetic test was conducted by the fraction 30-50% on the alpha-amylase of adults and the type of inhibition was determined uncompetitive. In the zymogram and studying inhibition on the gel, the inhibitory effect was seen as a reduction in intensity of the bands. In bioassays, different cultivars of potato; Agria, Burren, Picasso and Marx were used. Potato leaves were treated with extract and fed by larvae. No significant difference was observed in the duration of molting from third to fourth-instar larvae on any cultivars. But, weight of fourth-instar larvae was declined on Picasso and Marx and the percentage of fourth instar larval evaluation was decreased on Agria, Picasso and Marx. The alpha-amylase activity of fourth instar larvae declined on Agria, significantly compared to the control.
Keywords: Ammonium sulfate protein precipitation, Bioassay, Enzyme inhibition kinetic, Leptinotarsa decemlineata, Zymogram.
