رديابي و تعيين استرين ويروس واي سيب زميني به روش تاس الايزا و آرتي پي سي آر از مزارع فلفل استان گلستان

چكيده ويروس واي سيب زميني (Potato virus Y, PVY) يكي از ويروس هاي مخرب گياهان تيره ي سولاناسه مي باشد كه در استان گلستان از سيب زميني و توتون گزارش شده است، اما در خصوص وجود آن در مزارع فلفل استان تاكنون بررسي صورت نگرفته است. با توجه به اهميت فلفل به عنوان يكي از ميزبان هاي مهم PVY و كشت محصولات تيره ي سولاناسه در مجاورت يكديگر، آگاهي از وجود اين ويروس در فلفل، حايز اهميت مي باشد. در اين بررسي تعداد 80 نمونه ي برگي با علايم موزاييك، پيسك، كوتولگي و بدشكلي از مزارع فلفل استان جمع آوري گرديد و آلودگي آن ها با استفاده از آنتي بادي پلي كلونال PVY در آزمون سرولوژيكي TAS-ELISA بررسي شد. از مجموع 80 نمونه ي فلفل، 10 نمونه از دو منطقه گرگان ودلند واكنش مثبت نشان دادند كه عصاره ي دو نمونه ي آلوده از اين دو منطقه به روش مكانيكي به گياه محك توتون رقم سامسون مايه زني شد. پس از دو هفته علايم موزاييك، نكروز وكلروز در نمونه هاي تلقيح شده ظاهر گرديد. آلودگي گياهان محك به PVYبا استفاده از آنتي-بادي هاي مونوكلونال PVYC،PVYO وPVYN در آزمون الايزا مورد بررسي قرار گرفت. طبق نتايج بدست آمده، نمونه ي دلند با آنتي بادي مونوكلونال ويژه استرين C و نمونه ي گرگان با استرين NوO عكس العمل نشان دادند. نتايج حاصل از آزمون RT-PCR با استفاده از آغازگرهاي عمومي و اختصاصي ژن پروتيين پوششي PVY، آلودگي نمونه ها به PVY را اثبات نمود. اين اولين گزارش از آلودگي مزارع فلفل استان گلستان به PVYمي باشد. واژه هاي كليدي: ويروس واي سيب زميني، فلفل، گياه محك، TAS-ELISA، RT-RCR.

Abstract Potato virus Y (PVY) is one of the most damaging viruses of solanaceae family which has been reported from potato and tobacco growing areas in Golestan province; however, this virus has not been studied in pepper fields yet. Due to importance of pepper plants as one of the important hosts of PVY and also cultivation of solanaceous crops in close proximity to one another, the occurrence of PVY in pepper growing farms in Golestan province has been studied. A total of 80 pepper leaf samples showing symptomatic mosaic, mottle, dwarfing and deformation were collected. The PVY infection of the samples was investigated using PVY polyclonal antibody in TAS-ELIASA test. Among 80 pepper samples, 10 samples from each two regions of Daland and Gorgan had the infection. Two positive samples were inoculated on Nicotiana tabacum cv. samsun by mechanical method. Inoculated plants showed symptoms of necrosis and chlorosis in two weeks after infection, and infection of symptomatic plants was confirm by using monoclonal antiserum specific against PVYN, PVYO and PVYC in ELISA test. Results of this study indicated that Daland sample was infected by PVYC, whereas Gorgan sample was infected by PVYN and PVYO strains. Results of RT-PCR test using both general and specific primers covering a part of coding region of CP confirmed infection of samples to PVY. This is the first report of PVY infection of pepper plants in Golestan province. Keywords: Indicator plant, Pepper, Potato virus Y, RT-RCR, TAS-ELISA.