بررسي چندشكلي ژن پرولاكتين در برخي توده هاي مرغان بومي خوزستان با روش PCR-RFLP

Evaluation of a part of the dietary methionine substitution by betaine on fatty acid synthase gene expression in laying hens under heat stress

پرولاكتين هورموني است كه نقش مهمي در رفتار كراچي پرندگان دارد. بسياري از مطالعات نشان داده اند كه ژن پرولاكتين مي تواند ژن كانديدا براي كرچي باشد و تنوع موجود در بخش هاي مختلف اين ژن، پتانسيل ويژه اي براي استفاده به عنوان نشان گرهاي ژنتيكي از خود نشان داده و مي تواند به بهبود ژنتيكي جمعيت ها كمك كند. هدف از اين مطالعه، بررسي چندشكلي ژن پرولاكتين در برخي توده هاي مرغان بومي خوزستان با روش PCR-RFLP بود. براي اين منظور از تعداد 100 قطعه مرغ بومي ايستگاه تكثير و اصلاح نژاد مرغ بومي نهاده هاي دامي جهاد استان خوزستان (شهرستان باوي)، به صورت تصادفي خون گيري انجام شد. با استفاده از روش تغيير يافته استخراج نمكي، DNA نمونه ها استخراج شد. واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) جهت تكثير قطعه 439 جفت بازي ژن پرولاكتين توسط آغازگرهاي اختصاصي صورت گرفت. قطعه تكثير شده به وسيله ي آنزيم برشي AluI هضم شد. فراواني آلل هاي C و T به ترتيب 0/655 و 0/345 و فراواني ژنوتيپ هاي CT ،TT و CC به ترتيب 0/10 ، 0/49 و 41/ 0 برآورد شدند. با استفاده از آزمون كاي مربع (2X) مشخص شد كه فراواني آلل ها در اين جايگاه ژني در حالت تعادل هاردي - وينبرگ نمي باشد. نتايج نشان داد كه ژن پرولاكتين در منطقه ي مورد بررسي داراي چندشكلي مي باشد و روش PCR-RFLF براي تعيين ژنوتيپ هاي ژن پرولاكتين مرغان مورد مطالعه، مناسب مي باشد.

Current study was performed to evaluate a part of the dietary methionine substitution by betaine on fatty acid synthase gene expression in laying hens under heat stress. Present study was conducted in a completely randomized design (CRD) with a 2 ×2 factorial experiment using 96 (65-week) hens in Line strains W36. First factor was done with 2 dietary treatments with 2 levels; 100% methionine, 87% methionine and 13% betaine and second factor with 1 level without heat stress and 1 with (salon with 35 oC); (Salon with 23 oC) with 4 treatments and 3 repetition (8 birds in each repetition). To achieve appropriate stress, the hens were daily exposed under 35 oC for 6 hours. After 2 month of feeding, 4 birds were eventually slaughtered and fatty acid synthase gene expression was assessed by means of specific primer and real time PCR analysis. The results indicated that addition of betaine to died and exposure heat stress caused a significant decline in fatty acid synthase gene expression being 1.98 and 2.15 fold in liver tissue, respectively (P<0.01). Hence, addition of betaine and heat stress exposure might inhibit fatty acid synthase gene expression in mRNA state and reduce fat synthesis in the body by reducing the expression of fatty acid synthase. There for, betaine may adverse the effects of heat stress in poultry.