اثر رقيق كننده ها و غلظت هاي مختلف مواد محافظ سرمايي (متانول و گليسرول) روي كيفيت اسپرم انجمادزدايي شده ماهي قرمز (Carassius auratus)

Effect of several extenders and different concentrations of cryoprotectants (methanol and glycerol) on quality of goldfish (Carassius auratus) post-thawed sperm

در اين آزمايش از 4 رقيق كننده (رقيق كننده 1: 46/0 گرم كلريد پتاسيم، 93/1 گرم فروكتوز، 5/0 ميلي‌ليتر آنتي بيوتيك; رقيق كننده 2: 34/0 گرم كلريد سديم، 43/3 گرم ساكارز، 5/0 ميلي‌ليتر آنتي‌بيوتيك؛ رقيق كننده 3: 46/0 گرم كلريد پتاسيم، 41/3 گرم ساكارز، 5/0 ميلي‌ليتر آنتي‌بيوتيك؛ رقيق كننده 4: 87/3 گرم فروكتوز، 5/0 ميلي‌ليتر آنتي‌بيوتيك) استفاده شد و همچنين از متانول و گليسرول به عنوان ماده محافظ سرمايي استفاده شد. هر كدام از مواد محافظ سرمايي در غلظت هاي 5، 10 و 20 درصد به رقيق كننده ها اضافه شدند. سپس رقيق كننده ها با نسبت 1:1 با اسپرم مخلوط شده و سپس اسپرم منجمد شد. بعد از 5 و 10 روز اسپرم‌ها از حالت انجماد خارج شدند. نتايج به‌دست آمده از آزمايش نشان داد كه اثر رقيق كننده ها همراه با غلظت هاي مختلف متانول و گليسرول روي طول دوره تحرك و درصد تحرك اسپرم ماهي قرمز پس از 5 و 10 روز انجماد، اختلاف معني‌داري داشت (05/0 > P). بالاترين طول دوره تحرك و درصد تحرك اسپرم‌ها پس از 5 و 10 روز انجماد در اسپرمي مشاهده شد كه حاوي رقيق كننده 2 و متانول با غلظت 20 درصد بود (به‌ترتيب 53/13± 00/84 ثانيه و 80/2±20/31 درصد؛ 28/15± 60/75 ثانيه و 51/2±33/25 درصد). نتايج حاصل از آزمايش نشان داد كه بهترين رقيق كننده براي انجماد اسپرم ماهي قرمز، رقيق كننده 2 و بهترين ماده محافظ سرمايي براي انجماد اسپرم ماهي قرمز، متانول بود.

In this experiment, four extenders (extender 1: 0.46 g KCl, 1.93 g fructose, 0.5 ml antibiotic; extender 2: 0.34 g NaCl, 3.43 g sucrose, 0.5 ml antibiotic; extender 3: 0.46 g KCl, 3.41 g sucrose, 0.5 ml antibiotic; extender 4: 3.87 g Fructose, 0.5 ml Antibiotic) along with methanol and glycerol as cryoprotectant were used. Each cryoprotectant at concentrations of 5, 10 and 20% were added to the extenders. Then, extenders with a 1:1 mixture ratio of the extenders and sperms was collected and the sperm was frozen. Frozen sperms after 5 and 10 days were excluded from freezing. The results of the experiment showed that the effect of extenders with different concentrations of methanol and glycerol on motility duration and motility percentage of goldfish post-thawed sperms after 5 and 10 days of freezing were significantly different among treatments (P < 0/05). The highest motility duration and motility percentage of sperms after 5 and 10 days of freezing was related to the sperm containing extender 2 and methanol concentration was 20% (84.00±13.53s and 31.20±2.80%; 75.60±15.28 s and 25.33±2.51%, respectively). The results of the experiment showed that the best extender for sperm cryopreservation of goldfish was extender 2 and the best cryoprotectants for sperm cryopreservation of goldfish was methanol.