تعيين تيپ جدايه هاي كلستريديوم پرفرينجنس جدا شده از گوسفند در منطقه ي اهواز

Typing of Clostridium perfringens isolates from sheep in Ahvaz

كلستريديوم پرفرينجنس باكتري پاتوژن مهمي است كه باعث بيماري هاي مختلفي در دام ها مي شود. اين باكتري در 5 تيپ A، B، C، D و E طبقه بندي مي شود. تيپ D كلستريديوم پرفرينجنس عامل ايجاد بيماري آنتروتوكسمي در دام ها است. هدف از اين مطالعه تعيين تيپ هاي مختلف كلستريديوم پرفرينجنس در منطقه ي اهواز بود. 369 نمونه مدفوع به صورت تصادفي از گوسفندان اين منطقه، جمع آوري گرديد. پس از آماده سازي و كشت نمونه ها در محيط آگار خون دار حاوي نيومايسين، باكتري هاي مظنون به كلستريديوم پرفرينجنس با استفاده از روش هاي مورفولوژيكي و بيوشيميايي تعيين هويت شدند. در مجموع از 369 نمونه مدفوع جمع آوري شده، با استفاده از روش هاي مورفولوژيكي و بيوشيميايي، تعداد 56 جدايه مظنون به كلستريديوم پرفرينجنس جداسازي و شناسايي گرديد. براي تاييد مولكولي جدايه ها، DNA اين جدايه ها استخراج و با استفاده از پرايمر هاي اختصاصي توكسين آلفا، تاييد مولكولي جدايه ها با PCR صورت گرفت. نتايج نشان داد كه از 56 جدايه ي كلستريديوم پرفرينجنس، 54 جدايه به عنوان كلستريديوم پرفرينجنستاييد ملكولي شدند. تعيين تيپ اين جدايه ها با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي اگزوتوكسين هاي پنج گانه ي تيپ هاي مختلف اين باكتري صورت پذيرفت. نتايج نشان داد كه از مجموع 54 جدايه، به ترتيب 10 (18.52 درصد)، 4 (7.41 درصد)، 24 (44.44 درصد) و 16 جدايه (29.63 درصد)، تيپ A، تيپ B، تيپ C و تيپ D مي باشند. بنابراين شايع ترين تيپ هاي اين باكتري در اين منطقه ي تيپ هاي C و D هستند. در اين مطالعه، هيچ يك از جدايه ها واجد ژن توكسين يوتا و نيز ژن آنتروتوكسين نبودند.

فارسي حــذف 437976 Clostridium perfringens is an important pathogen which causes numerous different diseases in animals. This bacterium is classified into five different types; A, B, C, D and E. Clostridium perfringens type D cause enterotoxemia in animals. The aim of this study was to identify different types of Clostridium perfringens in sheep in Ahvaz. For this purpose, 369 fecal samples were randomly collected from the sheep from a different area. After processing and culturing samples in blood agar containing neomycin, Clostridium perfringens suspected isolates were identified morphologically and biochemically. According to biochemical tests, from 369 feces samples, 56 isolates obtained and identified as Clostridium perfringens. For molecular confirmation of the isolate, the DNA of the isolates was extracted and the isolates were verified as Clostridium perfringens by PCR using specific primers for alfa toxin. The results showed that 54 isolated from 56 isolated confirmed as Clostridium perfringens. Typing of these isolates was done by PCR using specific primers for 5 different exotoxins of this bacterium. The results showed that 10 isolates (18.51%) were type A and 4 (7.4%), 24 (44.44%) and 16 isolates (29.62%) were type B, type C and type D respectively. Thus the most prevalent types of Clostridium perfringens were type C and D. In the present study, all isolates were negative for iota toxin and enterotoxin gene.