آثار غلظت‌هاي مختلف عصاره بافت تخمدان بر تكوين فوليكول‌هاي پره آنترال موش پس از كشت سه بعدي

The Effects of Different Concentrations of Ovarian Tissue Extract on Preantral Mouse Follicle Development after Three-dimensional Culture

هدف: هدف از اين مطالعه بررسي آثار غلظت‌هاي مختلف عصاره بافت تخمدان بر رشد و بلوغ فوليكولي و همچنين توليد هورمون‌‌هاي استروييدي پس از كشت سه بعدي بود. مواد و روش‏ها: ابتدا عصاره بافت تخمدان‌هاي موش بالغ تهيه شد؛ سپس ميزان پروتيين آن‌ها محاسبه شد. فوليكول‌هاي پره آنترال نيز از تخمدان‌هاي موش‌هاي نابالغ جدا شدند و پس از كپسوله شدن با هيدروژل آلژينيت در محيط كشت پايه ?-MEM غني شده با غلظت‌هاي 4 برابر، 2 برابر، مساوي، 2/1 (يك دوم) و 4/1 (يك چهارم) و 8/1 (يك هشتم) پروتيين موجود سرم گاوي از عصاره تخمدان در مقايسه با گروه شاهد كه محيط پايه حاوي 10 درصد سرم جنين گاو بود، به‌مدت 12 روز كشت شدند. طي دوره كشت بررسي ميانگين قطر، ميزان بقا، ميزان رشد و بلوغ فوليكول‌ها و همچنين توليد هورمون 17-بتا استراديول و پروژسترون ارزيابي شد. نتايج: فوليكول‌هاي كشت شده در تمام غلظت‌هاي مختلف عصاره تخمدان رشد خوبي نداشت و فقط در گروه حاوي عصاره بافت تخمدان معادل شده با 2/1 پروتيين موجود در پروتيين سرم گاوي نرخ زندن ماندن 78/71 درصد در مقايسه با گروه كنترل كه 75 درصد بود داشت. در اين گروه نيز ميانگين قطر فوليكول‌ها، ميزان تخمك‌هاي بالغ (MII)، ميزان ترشح هورمون‌هاي 17-بتا استراديول و پروژسترون افزايش قابل توجهي را نسبت به گروه كنترل داشت (05/0?P). نتيجه‌گيري: بنابراين در مجموع از مطالعه حاضر چنين مي‌توان نتيجه گرفت كه عصاره بافت تخمدان به‌عنوان يك عامل تكثيري و بلوغي باعث افزايش رشد و تكوين فوليكول‌هاي پره آنترال تا مرحله بلوغ مي‌شود و مي‌تواند بر عملكرد آن‌ها نيز تاثير داشته باشد و براي بهبود شرايط كشت آزمايشگاهي فوليكول‌ها استفاده شود و اين امر كاملاً وابسته به مقدار عصاره به كار گرفته شده است.

Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of ovarian tissue extract on isolated preantral follicle growth, maturation, and hormone production of neonatal mouse ovaries after three-dimensional culture. Methods: We obtained the tissue extract from adult mouse ovaries and determined their protein concentrations by the Bradford method. The experimental group comprised mechanically isolated preantral follicles after encapsulation with alginate hydrogel in ?-MEM supplemented with different concentrations of ovarian tissue extract and in 10% fetal bovine serum as the control group. Both groups were cultured for 12 days. At the end of the culture period, we assessed the mean diameters, survival and maturation rates, production of 17-B estradiol, and progesterone hormones. Results: The follicles cultured in different concentrations of ovarian tissue extract underwent degeneration, with the exception of the group that contained tissue extract (one-half the protein level of FBS) which had a 71.78% survival compared to the control (75%). The average follicle diameter, rate of MII oocytes, production of 17-B estradiol, and progesterone hormones were significantly higher in the group supplemented with ovarian tissue extract (one-half the protein level of FBS) compared to the control group (P < 0.05). Conclusion: Ovarian tissue extract, as a proliferation and maturation factor, leads to growth, maturation, and better function of preantral follicles. This extract can be used to improve the in vitro follicular culture in a dose-dependent manner.