تشخيص سريع مولكولي ليستريامنوسايتوژنزدر سس هاي صنعتي سرد ايران

Rapid molecular detection of Listeria monocytogenes in Iran industrial sauce

سابقه و هدف : باكتري ليستريامونوسايتوژنز به عنوان يك عامل بيماري زاي قابل انتقال از طريق مواد غذايي و مسيول ايجاد بيماري در انسان شناخته شده است. اين باكتري عامل مننژيت، سقط جنين و مسموميت غذايي در انسان است. سس هاي صنعتي به عنوان يك ماده غذايي پرطرفدار روز به روز مصرف بيش تري در بين عامه مردم پيدا كرده اند. اين ماده غذايي، بستر مناسبي براي ايجاد مسموميت هاي غذايي مي باشد. بنابراين آلودگي با ليستريامونوسيتوژنز تهديدي براي سلامتي به ويژه افراد با سركوب سيستم ايمني محسوب مي-گردد. هدف از اين مطالعه تشخيص سريع مولكولي ليستريامونوسايتوژنز در سس هاي صنعتي سرد ايران است. مواد و روش ها : تعداد 25 نمونه از سس هاي صنعتي از بازار ايران جمع آوري گرديد. DNA نمونه ها به روش استاندارد فنل/ كلروفرم استخراج شد. تست PCR تشخيص ليستريامونوسايتوژنز با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي بهينه و از جهت ويژگي و حد تشخيص (LOD) بررسي شد. همه نمونه ها از جهت حضور ليستريامونوسايتوژنز با استفاده از تست بهينه PCR مورد ارزيابي قرار گرفتند. يافته ها : تست PCR بهينه و محصول bp226 در ژل آگاروز 2% مشاهده شد. LOD تست در حد 10 enome/reaction به دست آمد و در آزمون ويژگي به غير از ليستريا مونوسايتوژنز با هيچ نمونه اي آمپليكون مشاهده نگرديد. از 25 نمونه سس، 4 عدد از نظر ليستريامونوسايتوژنز مثبت گرديد. نتيجه گيري: تكنيك PCR با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي، بسيار دقيق و سريع تر نسبت به متدهاي سنتي براي تشخيص ليستريا مونوسايتوژنز عمل مي نمايد. نتايج اين پژوهش نشان مي دهد كه تكنيك PCR روشي مناسب جهت پايش ميكروارگانيسم ها در مواد غذايي هم چون سس ها مي باشد.

Aim and Background: Listeria monocytogenes is known as a food-borne pathogen responsible for causing disease in humans. This bacterium that cause meningitis, abortion and food poisoning in humans. Industrial sauce as a matter of day-to-day offer food consumption among the general population have found. This food, suitable for food poisoning. Therefore contamination with Listeria monocytogenes is a threat to health, especially those with suppressed immune systems. The aim of this study is molecular detection of listeria monocytogenes in industrial sauce in Iran. Materials and Methods: 25 Industrial sauces were collected from Iran markets. DNA samples extracted by standard phenol-chloroform method . PCR test optimized and detection of limits (LOD) and specificity evaluated. All of the samples tested with optimized PCR test. Results: PCR test Optimized and 226 bp amplicon was observed in 2% agarose gel electrophoresis. LOD test was obtained 10 genome/reaction and in specificity test, amplicon was not observed with none of microorganism DNA was tested. After PCR testing on 25 sauce samples,4 were positive for Listeria monocytogenes. Conclusion: PCR technique using specific primers very carefully and faster than traditional methods is for the identification of Listeria monocytogenes. The results show that the PCR technique is a good way to monitor microorganisms in food products such as sauces.