جداسازي و شناسايي سيست Dunaliella salina (Chlorophyceae)از رسوبات ساحلي ليپار (درياي عمان) با استفاده از آناليز مولكولي

برخي از گونه هاي فيتوپلانكتون در شرايط نامساعد و در چرخه زندگي توليدمثلي خود سيست توليد كرده كه در رسوبات كف ته نشين مي شوند و تحت شرايط مساعد مجدداً شكوفا شده و به ستون آب برمي گردند. بمنظور شناسايي دقيق مورفولوژي، گونه-هاي فيتوپلانكتون در دو مرحله ي سيست و متحرك بررسي گرديدند زيرا برخي از سيست هاي مشابه به فيتوپلانكتون متفاوتي تبديل مي شوند. هدف از اين تحقيق، كشت سيست هاي موجود در رسوبات خليج چابهار منطقه ليپار و شناسايي نمونه هاي شكوفا شده مي‌باشد. رسوبات از منطقه ليپار در سال 1394 توسط Ekman Grab با سطح جمع كنندگي 225 سانتي‌متر مربع جمع‌آوري گرديد. سيست زنده گرد ناشناخته بصورت انفرادي از رسوبات جدا سازي شد و در فايكولب در شرايط كاملاً استريل ب‌صورت جداگانه تحت شرايط 12 ساعت روشنايي و 12 ساعت تاريكي در درجه حرارت °C1±25 در محيط كشت F2، كشت داده شدند. بررسي مورفولوژي گونه شكوفا شده نشان داد كه سيست جدا شده متعلق به گونه Dunaliella salina مي‌باشد. جهت تاييد شناسايي استرين خالص حاصل از كشت سيست مورد نظر، استخراج DNA و سپس واكنش زنجيره اي پلي مراز (PCR) انجام گرديد. توالي ژني گونه D. salina با توالي ژني گونه هاي مشابه از بانك ژن مقايسه گرديد. بررسي مولكولي و فيلوژني گونه نشان داد كه گونه شكوفا شده از نظر توالي نوكليوتيدي بيشترين شباهت را با گونه D. salina دارد. همچنين، اين مطالعه نشان داد كه ‌گونه D. salina از سواحل جنوب ايران توانايي توليد سيست را دارد

Some species of phytoplankton under unfavorable environmental conditions and in their sexual life cycle produce resting cyst that settle to the bottom sediments and become motile in the water column when suitable conditions provided. Phytoplankton species were studied in two stages of motile and cyst for accurate identification of morphology, because some similar cysts may convert to a different phytoplankton and vice versa. The objectives of this study were to culture cysts that isolated from sediments of Lipar zone located in the southeast coast of Iran and to identify excysted samples. Sediment samples from Lipar zone were collected by Ekman grab with 225 cm2 area in 2015. Unknown live and orbicular single cysts were isolated from sediments and cultured in sterile conditions in phycolab using f2 medium under 12 hours light and 12 hours dark cycles at 25±1°C. Assessment of excysted plankton morphology revealed that the cyst is belonged to Dunaliella salina species. In order to confirm this morphological identification, DNA of the plankton was extracted and PCR was performed. The sequence of the sample was compared with the sequences of the similar species from GenBank. Phylogeny and molecular analysis confirmed this identification. The present study revealed that D. salina from the south coast of Iran was able to produce resting cyst.