بررسي بيان ژن RORA در بيماران مبتلا به مولتيپل اسكلروزيس (MS) در مقايسه با گروه شاهد در جمعيت ايراني

Investigation of RORA Gene Expression in Iranian Multiple Sclerosis (MS) Patients

بيماري مولتيپل اسكلروزيس (MS) يكي از مهم ­ترين بيماري­ هاي خودايمن است كه سيستم اعصاب مركزي را هدف قرار مي­ دهد. اين بيماري به عنوان دومين عامل ناتواني حركتي در دنيا شناخته شده و گسترش روزافزوني داشته است. گرچه علل اصلي بروز بيماري ام اس همچنان ناشناخته است اما احتمال مي­رود سلول­ هاي CD4(+) T اختصاصي ميلين، نقش مركزي را در آغاز و هماهنگي التهاب CNS ايفا مي­ كنند. طبق اين نظريه، سلول­ هايCD4(+) T فعال شده در پريفرال به CNS نفوذ كرده در آنجا با القا ترشح سيتوكين ­ها و كموكين­ ها باعث آغاز آبشار التهابي مي­شوند. سلول­ هاي Th17 كه يك رده از سلول­ هاي CD4(+) T به تازگي شناسايي شده­اند در بروز مالتيپل اسكلروزيس نقش عمده ­اي را ايفا مي­كند. با توجه به نقش ژن RORΑدر مسيرهاي تكاملي سلول­ هاي Th17 و همچنين انواع گيرنده ­هاي ROR به عنوان اهداف درماني ام اس، بررسي اين ژن در بيماران مي­تواند در تشخيص و يافتن علل مولكولي بيماري كمك كند. 30 نفر بيمار مبتلا به مالتيپل اسكلروزيس و 30 نفر فرد سالم كه از نظر سن و جنس همسان­ سازي شدند، انتخاب گرديدند. بعد از پر كردن پرسشنامه از افراد خون ­گيري انجام شد و Total RNA استخراج و سپس cDNA سنتز شد. با روش TaqMan Real-Time PCR بيان ژن RORAمورد بررسي قرار گرفت. داده­هاي بدست آمده بوسيله نرم ­افزارهاي Linreg و REST 2009 مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. نتايج نشان داد بيان ژن RORA در افراد مبتلا به ام­اس در مقايسه با افراد نرمال كاهش معني­ داري نشان نمي­ دهد (P=0.197 ). همچنين مقايسه بيان اين ژن در دو جنس زن و مرد هم كاهش معني­ داري نشان نداد (P=0.142, P=0.156). نتايج بيانگر عدم تفاوت معني دار بيان ژن RORA در بيماران MS نسبت به افراد سالم و كنترل مي ­باشد. مي ­توان چنين نتيجه­ گيري كرد كه سطح بيان ژن RORA تاثير مهمي در اين بيماري نداشته باشد.

Multiple sclerosis (MS) is one of the most important autoimmune diseases targeting central nervous system (OMIM: 126200). It is known to be the second factor of movement disability in the world which is increasing in recent years. It is essential to perform fundamental and functional studies on its prevention and treatment. Although the major causes of MS incidence are still unclear, CD4 (+) myelin-specific T cells play central role in generation and inflammation balance. Accordingly, activated CD4 (+) T cells in peripheral, penetrate into the CNS and trigger the inflammation cascade by inducing secretion of cytokine and chemokine. Among Th17 cells, one of CD4 (+) T cell lines is recently shown to be mainly involved in MS incidence. The role of RORA gene in the developmental pathways Th17 cells, and regarding evidence suggesting RORA receptors as potential treatment targets respecting inflammation disorders such as MS. Study on this gene would help us to discover the molecular causes of MS. We selected 30 individuals affected with MS and 30 healthy normal controls matched in gender and age. After filling a questionnaire, peripheral blood was obtained and total RNA was extracted by GeneAll kit. Then, cDNA was synthesized using GeneAll cDNA synthetize kit. Expression of RORA gene was investigated using TaqMan Real-Time PCR. Results were analyzed using Linreg and Rest 2009 software. Expression of RORA gene was not significantly reduced compared to controls (P=0.197). Moreover, expression of RORA gene was not significantly different between genders (P=0.142, P=0.156). There was no significant difference in RORA gene expression between cases and control group. Expression level of RORA gene may have not important effect on the disease.